有效微生物群(EM)中抑藻酵母及其活性物质特性.pdfVIP

生态环境学报 2009, 18(6): 2033-2038 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 有效微生物群(EM)中抑藻酵母及其活性物质特性 * 叶秋雯，王志平，于晓娟，丁丛，蔡伟民 上海交通大学环境科学与工程学院，上海 200240 摘要：采用选择性培养基从有效微生物群(EM) 中富集出酵母菌，通过向对数增长期的混合藻液中加入酵母菌、葡萄糖、酵 母菌+葡萄糖、经酵母菌发酵除菌后的葡萄糖溶液分别考察了其对水华藻的抑制效应。结果表明，混合酵母菌自身对于水华 藻没有抑制作用，单独添加葡萄糖的水华藻甚至出现快速增殖；而在添加葡萄糖+酵母菌或酵母菌发酵液的实验中水华藻近 似被完全抑制，最大抑制率达 97%。据此可知，抑制水华藻增殖的并非酵母菌自身，而是具有高热稳定性的胞外分泌物。 HPLC-SEC 与三维荧光光谱分析表明，酵母菌发酵液中含有明显的芳环类羧酸及蛋白质物质，但由于其在高温灭菌后仍有良 好的抑藻活性，因而进一步确定其抑藻活性物质为含苯环的有机酸。此外，依据对实验中水华藻细胞形态的显微镜观察，该 酸性胞外物可能是通过破坏藻细胞的叶绿体结构来达到抑藻效果的。 关键词：有效微生物群(EM) ；酵母菌；胞外分泌物；水华藻；抑制 中图分类号：Q143 文献标识码：A 文章编号：1674-5906 （2009 ）06-2033-06 富营养化水体发生的水华污染直接导致水体 制藻类增殖的主要微生物种类，则可大大加速其扩 的浊度上升、可见度下降而影响自然景观；同时， 培进程，增强其对土著微生物的竞争优势，从而更 藻类自身代谢容易消耗大量的溶解氧而使水体缺 有针对性的抑制水华藻的过度增殖。为此，本项研 氧、水生生物窒息死亡，而死亡生物的厌氧分解又 究拟采用选择性培养基富集出酵母菌，探讨其对水 会产生恶臭污染；且部分水华藻类产生的藻毒素会 华藻的抑制效率及其抑制活性表达，以期为探索新 沿食物链传递而威胁人类的健康，因此，如何有效 型生物抑藻技术提供理论基础。 控制水华污染一直是人们关注的热点[1-2]。 1 材料与方法 20 世纪 60 年代，研究人员通过对水华消亡过 1.1 实验材料 程的观察，发现在水华藻类上附生有多种微生物， 藻种及其培养：取自上海交通大学闵行校区思 并能有效分解藻类，据此推断这些微生物与水华消 源湖，使用 BG-11 培养基置于智能人工气候箱 失有很大关系，并展开了有关病毒、真菌以及细菌 (RXZ2300B 型) 中培养。BG-11 培养液配制方法见 溶藻的研究[3] 。随着研究的深入，研究人员逐渐认 文献[14]。培养条件：温度(26±1) ℃，光暗比 14 ∶10， -1 -1 识到，溶藻细菌主要是通过释放胞外活性物质来杀 光照40 μmol·m ·s (约为3 000 lx) ，采用JD23 型数 [4-5] [6] 灭藻类，具体包括蛋白质类 、氨基类 及抗生素 字式照度计测定。 类[7]有机化合物。国内外已报道有数十种溶藻细菌， EM 菌：购自上海泓宝绿色水产科技发展有限 有些甚至已申报了相关专利[8] 。然而，由于这些微 公司。 生物胞外物质存在提取分离困难及生物安全性等