利用活细胞实时摄影技术考察癌细胞自发微核来源的初步研讨.pdfVIP

囤 论又题目到旦溘纽丛甚吐握型越盘盔竖盔纽堕 鱼基生生盎盗塑麴生盟坌 作者姓名 生立堂 学科亏业 生盐些茔圭壹主生盘生 导师姓名 生生芏 堑垄 完成时间 三QQ垒生±旦 摘要 摘要 微核与染色体畸变、非整倍体发生以及DNA损伤有着密切的联系，因而被 广泛地用作检测细胞遗传损伤以及外源(环境)因子和细胞内源因子引起的染色 体不稳定性的生物学标志。尽管应用十分广泛，但由于传统细胞生物学和遗传 学实验技术的限制，微核如何发生这一基本科学问题至今仍未能得以阐明。随 着细胞生物学和遗传学的进步，新近发展起来的活细胞实时摄影技术为长时间 连续追踪观察细胞的各种生理变化过程(包括细胞内染色体物质的动态行为)、 确定细胞命运等提供了可能。 本研究利用活细胞实时摄影技术，连续追踪记录宫颈癌细胞HeLa中微核 的发生途径和过程，旨在系统地阐明自发微核的来源及其细胞遗传学机制。 研究结果第一次直观地证实了自发微核起源的传统观点：1)来自于分裂中 期未能正常定位于细胞赤道板的染色体(displaced 于分裂后／末期的落后染色体(1agging 色体桥(chromosome 4)但不支持可能来自于S期形成的细胞核芽(nuclearbuds)。此外，我们的研究 还第一次揭示了自发微核来源的新途径：1)来自于母细胞中已有的微核；2) 来自于有丝分裂过程中从主细胞核上脱落的细胞核碎片；3)来自于随胞质外排 但随后融合进入子细胞的染色体。统计分析表明，尽管绝大多数自发微核来自 于落后染色体(63．66％)、异常定位染色体(10．97％)以及断裂的染色体桥残片 异常的两极分裂并不能产生微核。 总之，本研究用HeLa细胞作为研究模型，首次运用长时间活细胞实时摄 影技术，为自发微核的来源途径提供了第一批直接证据，即自发微核来源于多 条途径，但不同途径对微核形成的作用不同。该发现对微核来源的已有知识进 行了验证和补充，将有助于阐明微核测试中外源因子导致细胞遗传损伤或者细 胞癌变过程中遗传物质异常的发生机制。 关键词：微核，活细胞实时摄影，落后染色体，染色体桥，多极分裂 Abstract ABSTRACT relatedtoc11romosome are aberration， closely Micronuclei(MNi)，which to DNA been usedevaluate of and extensively aneuploidydamage，have generation chromosomeinducedeitherexternalorinternal instabilityby mostbasicissue their hasnotbeen addresseddueto regardingorigins completely traditional and limitationsof geneticmethods．Recently,thedevelopment cytologic