结核分枝杆菌与实验室生物安全.pptPPT.ppt

结核分枝杆菌与实验室生物安全;结核病的定义 结核病的疫情 结核病病原学 结核病的流行 结核病实验室生物安全 结核病实验室安全防护 结核病实验室废物处理 结核病职业暴露 ;结核病是由结核分枝杆菌（偶尔可由牛型或非洲型分枝杆菌）引起的一种细菌性疾病。结核病可累及全身各个器官，但以肺结核最为常见。该病具有传染性强，散播面广，不分地域均可发生。结核病可由呼吸道、消化道、皮肤等途径感染，但其主要传播途径是以空气为传播因子的呼吸道传染，而排菌的肺结核病人传染性更大，是传播感染的主要传染源。;结核病的疫情;*; 1. 杆菌型（基本形态）结核分枝杆菌正常典型的形态是直或稍弯曲、两端钝圆的杆菌。菌体 长1～4μm，宽0.3～0.6μm，无芽胞、无荚膜、无鞭毛，生长发育期间有分枝生长倾向。 ; 2. 滤过型 早在1901年，Foutes在检查细菌滤器滤过的???核分枝杆菌培养滤液时，在电子显微镜下观察到球状微粒体。1991年，Khomeko在豚鼠损坏性肺结核模型中证实了滤过型的存在。此球状微粒体可通过细菌滤膜，称为滤过型 。; 3. 颗粒型 1907年莫赫(Much)在结核性冷性脓肿、浆液性渗出液、干酪性淋巴结等脓液中观察到革兰染色阳性颗粒，称为莫赫颗粒。莫赫颗粒的重要意义在于这些颗粒型体仍有生机与活力，在适宜的营养条件下，可重新获得增殖，发育生长出典型结核分枝杆菌。; 4. 球菌型（L型） 结核分枝杆菌在体内外受物理、化学、免疫等因素的影响，维持菌体固有形态的细胞壁缺损或丧失，产生细胞壁缺陷型。细胞壁缺陷型细菌是1935年Kilienberger在英国Lister医学研究院研究念珠状链杆菌时首先发现的，故以Lister医学研究院的第一个字母，将细胞壁缺陷型细菌命名为L型菌。;结核分枝杆菌的染色特性;结核分枝杆菌的生长特性 ;结核分枝杆菌的抵抗力; 1. 物理因素影响 结核分枝杆菌生存能力较强，在温室和阴暗处干燥痰内可以存活6～8个月，粘附在飞扬的空气尘埃中可保持传染性8～10天。结核分枝杆菌一般较耐低温，在-6～8℃能存活4～5年。; 干热对结核分枝杆菌杀伤力弱，痰内结核分枝杆菌在100℃下需要4～5小时被杀灭。湿热对结核分枝杆菌杀伤力强，在60℃30分钟、70℃10分钟、80℃5分钟和90℃1分钟可将其杀死，因此煮沸与高压蒸气消毒是最有效的方法之一。; 结核分枝杆菌对光线和射线敏感，在太阳光直射下2～7小时死亡。病人用过的物品在强阳光下直晒半日，基本可达到消毒的目的。10～1mg/ml菌悬液，液层厚度3mm，用10W紫外线灯在距离确 0.5m处持续照射3分钟，在距离1m处持续照射 10分钟，经培养无细菌生长。但紫外线穿透力弱，难以透入固体物质内部和液体深层，因此紫外线通常用于空气和物体表面消毒。; 2. 化学因素的影响 化学消毒剂的种类很多，其杀菌的机制因化学药物种类不同而异。乙醇使菌细胞蛋白质变性、凝固而产生杀菌作用。结核分枝杆菌直接接触70%～75%乙醇5～30分钟可被杀死，因此可用于皮肤消毒。但由于乙醇能凝固蛋白，使痰表面形成一层把菌体包裹起来的膜，短时间内不能杀死细菌，故乙醇不能用于痰的消毒。; 苯酚主要通过破坏菌细胞膜而致细胞质内容物漏出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体脱氢酶和氧化酶等酶系统杀死结核分枝杆菌。2%苯酚 5分钟、5%苯酚1分钟能杀死结核分枝杆菌培养物。5%苯酚与痰液等量混合，24小时才能杀死结核分枝杆菌。煤酚皂溶液作用机制与苯酚相似，0.5%煤酚皂60分钟，1%煤酚皂45分钟，2%煤酚皂10分钟，5%煤酚皂5分钟，即能杀死结核分枝杆菌培养物。5%～10%煤酚皂等量混入痰标本，12小时可杀灭结核分枝杆菌。; 甲醛使菌细胞蛋白质变性凝固，丧失代谢功能致细菌死亡。1%甲醛处理结核分枝杆菌5分钟，可使细菌死亡。5%甲醛和痰液等量混合，处理12小时以上才能达到杀菌作用。; “84”消毒液是以氯为主要成分的消毒剂。氯是一种氧化剂，能使菌体的酶失活，还能与蛋白质的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢功能障碍，细菌死亡。0.5%“84”消毒液15分钟可杀死结核分枝杆菌培养物，但对在蛋白质混合液中的结核分枝杆菌几乎无消毒效果。; 结核分枝杆菌对酸、碱抵抗力强，在4%NaOH，3%HCL和6%H2SO4中30分钟仍能存活。临床应用酸或碱加入病人标本，消化蛋白质及杀灭杂菌，以此分离出结核分枝杆菌。结核分枝杆菌对染料，如1∶13000孔雀绿和1∶75000甲紫有抵抗力，通常在培养基内加入一定量的孔雀绿或甲紫抑制其他杂菌生长。对普通细菌有较强杀菌作用的新洁尔灭，对结核分枝杆菌几乎无消毒作用。 ;结核分枝杆菌的致病性; 结核病流行;影响结核分枝杆菌传播的主要因素;表1