实验十七 活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定.pptVIP

实验十七 活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定 活性污泥或水稻土中 甲烷形成活性的测定 实验目的 实验材料 实验程序 思考题 实验目的 初步掌握应用气相色谱仪测定厌氧生境中样品的甲烷形成活性。 加深对沼气发酵微生物学原理的理解。 加深对温室气体—甲烷产生的微生物学原理的理解。 实验材料Ⅰ 活性污泥 102G型气相色谱仪（测定条件）： 1. 采用热导检测器时，用2m长不锈钢柱一根，内装GDX—104担体，层析室温度400C，载气为N2，N2流速为25mL/min，甲烷出峰时间为19s，记录仪上纸速为10X60mm/h，灵敏度和衰减可视样品中甲烷的含量而定。进样量为0.5mL。 2.用氢火焰离子检测器时，用1m长不锈钢柱一根，内装GDX—502担体，层析室温度400C，载气为N2，N2流速为20mL/min，氢气流速为60mL/min，空气流速为700mL/min，记录仪记录仪上纸速为10X60mm/h，进样量为0.5mL。灵敏度和衰减可视样品中甲烷的含量而定。 实验材料Ⅱ 100mL带有异丁基胶塞的血清瓶若干。 1mL、10mL密封性能良好的注射器。 标准甲烷气体。 产甲烷菌培养基： HCOONa 4g CH3COONa 4g CH3OH 4mL NH4Cl 0.8g MgCl2 0.08g K2HPO4 3.2g KH2PO4 3.2g 酵母膏 0.8g 半胱氨酸 0.4g 刃天青（0.1%） 0.8mL H2/CO2（80/20体积比） 水 800mL pH 7.0—7.2 沼气发酵或土壤浸出液 240mL 实验材料Ⅲ 将上述培养基配制好，湿热灭菌后备用。 注：上述培养基厌氧配制，即采用亨格特厌氧装置，在配制过程中均用无氧N2置换容器中之空气的情况下进行，每只100mL血清瓶中装培养基30mL（参观示范）。 实验程序 活性污泥或水稻土产甲烷量的测定。 甲烷含量的计算。 添加不同量葡萄糖对产甲烷作用的影响。 实验程序Ⅰ （活性污泥或水稻土产甲烷量的测定） 每组称取15g活性污泥或15g水稻土放入装有30mL产甲烷菌培养基的血清瓶中，应注意在打开血清瓶上的异丁基胶塞时应立即充入无氧N2 ，不使外界的空气进入血清瓶内，盖好胶塞，在350C下培养4—15d，培养时间取决于样品中产甲烷菌数量和活性。培养结束，用1mL气密性好的注射器自血清瓶中抽取0.5mL气样，用气相色谱仪测定甲烷含量。 实验程序Ⅱ （甲烷含量计算） 因甲烷峰高与气体中甲烷含量成正比，故可用外标法来测定样品中的甲烷量。 实验程序Ⅲ （添加不同量葡萄糖对产甲烷作用的影响） 每组取两只100mL血清瓶，每只中装活性污泥（或水稻土）各15g，贴上标签，以A、B标记，记下加多少水，刚好淹没污泥（或土壤），其中A瓶中加0.5%葡萄糖，B瓶中加10%葡萄糖，摇匀，用异丁基胶塞塞好，于280C培养一周。取出瓶子，用pH试纸测定A、B瓶中的pH值，并测定甲烷形成量。 思 考 题 沼气发酵的原理是什么？ 为什么样品中加过量葡萄糖会使发酵液酸化？ 气相色谱仪测甲烷含量的原理是什么？可选用何种检测器？ 实验十七 结 束 * * 标准甲烷气体含量（%）X 测样中甲烷气体峰高（mm） 标准甲烷气体峰高（mm） X100 测样中甲烷含量（%）