第三章-植物器官和组织培养.pptVIP

一、无菌外植体的获得 1、茎尖、茎段、叶片的灭菌 2、根、块茎、鳞茎的灭菌 3、花蕾的灭菌 4、果实、种子的灭菌 3.2.3、植物叶培养 以叶器官为外植体进行的离体培养。 叶器官包括：叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、叶肉、子叶。 再生成植株的方式： 直接诱导形成芽， 先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化成植株。 1．叶形 椭圆形 扇形 叶器官经过灭菌和切割后，在适宜的条件下培养，其结果可能是是：1、不定芽或胚状体；2、愈伤组织；3、成熟叶。 叶的器官培养 愈伤组织 方法： 1）外植体消毒：幼嫩叶片冲洗干净 用70％酒精10s 饱和漂白粉液浸3～15min（或在0．1％L汞中浸3-5min） 无菌水冲洗3～4次 无菌干滤纸吸干 待用。 2）接种：灭菌过的叶组织切成约0．5cm见方小块或薄片(如叶柄和子叶) 接种在MS或其他培养基上 3)培养基：MS ＋ BA1-3mg／L ＋ NAA0．25mg／L 4)培养： 叶接种后培养条件为每天10-12h光照，光强1500-30001x。 2、影响离体根发生和生长的因素 a 培养基的种类 多采用MS ，Heller 基本培养基 b 生长调节剂 多使用NAA