NHL患者MMP9、MMP2的表达及紫杉醇对其表达影响的研究.pdf

摘 要 研究背景 基质金属蛋白酶(Matrix 保守的依赖于锌离子的内切蛋白水解酶家族，可降解基底膜和细胞外 基质的大多数蛋白质，其中属于明胶酶类的明胶酶A(MMP．2)和明 胶酶B(MMP一9)，主要降解明胶和Ⅳ型基底膜胶原。文献表明肿瘤 侵袭转移的潜能与肿瘤细胞及其基质细胞产生MMP一9和MMP．2的 能力有着密切的正相关关系，它们不仅参与细胞外基质的降解，而且 还对多种肿瘤细胞的粘附和能动性有影响。非霍奇金淋巴瘤fnon． Hodgkin’s 1ymphoma，M{L)是一种实体瘤，病变极少局限于原发部位， 易出现多中心起源和跨结区病变，至肝、脾、肺、消化系统、中枢神 经系统、皮肤等多部位病变。研究证明其侵袭和转移机制与大多数实 体瘤基本…1致，能表达并释放MMP．9、MMP．2及产生血管源性因子， 降解肿瘤细胞周围基质，促进血管生成。可见M^伸．9、MMP一2可能 在Nm侵袭转移机制中起重要作用。 出广谱而高效的抗痛活性，它能与微管结合，维持微管稳定性，抑制 微管解聚，使细胞周期阻滞于分裂期，对人的多种肿瘤细胞均有细胞 毒作用，具有较高的抗癌活性。紫杉醇除细胞毒作用外，还可抑制肿 瘤细胞侵袭和转移。有研究显示紫杉醇能通过降低MMP．9和MMP。2 的表达来抑制结肠癌的侵袭转移。紫杉醇在N】阻。方面的作用研究较 少，最近研究表明小剂量的紫杉醇治疗难治和复发的NHL有较好的 疗效。而它是否对NHL侵袭转移有抑制作用，是否对Ⅻ丑MMP．9、 MMP．2表达有影响，均有待进一步研究。 基于上述原因，本研究检测了N皿患者病理组织和血清中 MMP．9、MMP．2蛋白表达水平，以探讨NHLMMP．9、Mh佃．2表达 与NHL侵袭转移和预后的关系及其两者表达的相互关系。应用1i同 紫杉醇分多组干预高侵袭性NHLRaii细胞株，观察紫杉醇对Raii细 胞株增殖、粘附、侵袭以及MM口．9、MMP．2表达的影响，进一步探 讨紫杉醇抗肿瘤细胞侵袭转移的分子机制，为侵袭性淋巴瘤的治疗提 供新的思路。 第一部分：NHL患者病理组织MMP一9、MMP．2蛋白的表达 及其相互关系，分析其临床及预后的意义。方法：采用免疫组织化学 S．P法，检测了51例Nm，、17例良性增生性淋巴结炎中MMP一2、 生性淋巴结炎中均表达于胞浆，少见于胞核。MMP一9、MMP。2在NHL 中的高表达率分别为84-3％和64．7％，均高于良性增生性淋巴结炎的 蛋白的表达与性别、年龄、恶性程度、免疫分型、B症状、LDH水 临床分期有关，可能有助于预测M{L侵袭转移和预后。 第二部分：NHL患者血清MMP一9、MMP一2蛋白的含量 目的：探讨NHL患者血清中MMP．9、MMP．2蛋白含量水平及 其相互关系，分析其I临床及预后的意义。方法：采用明胶酶谱法榆测 含量水平。结果：MMP一9、MMP一2在NHL患者血清中的含量阳性率 分别为73．2％和78．O％，均高于健康成人血清中的42．9％和52．4％ 36．29+7．14 A-g蛋白一·l一，均高于健康成 A·g蛋白一·l。1和29．27+7．16 人血清中的9．51+3．70 A·g蛋白～·l。和17．42±4．88A·g蛋白～·l‘1 血清MMP．9、MMP．2蛋白含量水平均明显高于结外病变为O．1个的 别、年龄、恶性程度、免疫分型、B症状、LDH水平、PS状态均无 NHL患者血清中的含量较高，并与A衄Arbor临床分期和结外病变有 预测N眦侵袭转移和预后。 表达的影响 目的：探讨紫杉醇对R萄i细胞增殖、侵袭及MMP-9、MMP一2基 因表达的影响及其相互关系。方法：用Raji细胞株进行传代培养， MTT试验检测不同浓度紫杉醇对Ra．i细胞增殖、粘附能力的影响； 用transwell小室法，构建体外侵袭模型进行检测不同浓度紫杉醇对 Raji细胞侵袭能力的影响；用、}定量RT-PCR方法检测不同浓度紫杉 同浓度紫杉醇对Ra-i细胞M^佃．9、^心仰．2蛋白表达的影响，并探讨 侵袭能力的变化之间的相互关系。结果：1．紫杉醇对Ra证细胞的，{i 长具有抑制作用，具有明显的时间和浓度的依赖性(PO．05)；2．再 种浓度的紫杉醇均能抑制R蛳细胞粘附(P0．05)，具有明显的浓度 依赖性(P0．05)；3．不同浓度紫杉醇处理后的Raii细胞数量明显少 处理后的Raj