第八章生产有用物质.ppt

第八章?? 植物细胞培养 及次生代谢产物生产? 植物细胞培养是指单个细胞或小细胞团的培养;第一节 悬浮培养 悬浮培养：是指将单个细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术;一、初始培养细胞来源 1. 植物组织细胞作为细胞来源 （1） 用机械分离细胞 　　叶片研碎→过滤→离心净化细胞 　　缺点：?只适于细胞排列疏松，细胞间接触点少的叶片组织。 ?分离细胞产量及活性低。 ;（2）酶解法分离细胞 　　叶片→果胶酶液处理→过滤→离心净化细胞 缺点：由于细胞分化程度的差异，细胞的生理一致性较差，影响培养效果。 ;2. 愈伤组织作为初始细胞来源 （1）将未分化、易散碎的愈伤组织转移到液体培养基中，并置于摇床上80-100r/min振荡培养，获得悬浮细胞液 （2）孔径200μm筛网过滤，除去大块细胞团；离心， 除去小碎片。 （3）先后用孔径60～100μm和20～30 μm筛网过滤 净化细胞；离心，获得单细胞。 优点：分离方法简单适用 如果为进行快速繁殖；或为原生质体分离及基因转化提供大量材料，往往用胚性愈伤组织进行悬浮培养 ;二、悬浮培养的方法 一般按每克鲜重10ml培养基的比例接种。 培养初期，每3 天继代一次，120r/m摇床震荡培养。 悬浮细胞系稳定后，1~2周继代一次 悬浮液 : 新鲜培养继=