NB3通过NotchDeltex信号传导系统诱导胚胎神经干细胞向少突胶质细胞分化研究.pdfVIP

摘 要 自我更新的多潜能神经干细胞能够分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质 细胞。少突胶质细胞的突起环绕轴突，形成髓鞘，维持神经纤维电传导的稳定。 我们以往的研究表明，F3是新发现的Notch受体的配体，能够促进少突胶质细 胞的分化和成熟。在本项研究中，我们发现NB-3,F3家族的粘附分子，也是Notch 受体的配体，参与少突胶质细胞的发育、分化和成熟，对于髓鞘形成有重要意义。 在神经干细胞和少突胶质细胞系。LN-93的细胞膜表面表达Notch受体，作 为Notch的配体，NB-3与Notch胞外片段的EGF22-34重复序列结合后，诱导 Notch蛋白酶解，使Notch的胞内片段转移到细胞核内。抗EGF序列的抗体和 Y 酶抑制剂能够抑制NB-3的作用，表明NB-3介导的Notch的酶解是通过 Y酶介 导的在S3区的规律性跨膜蛋白裂解 (RIP). 经典的Notch受体的配体DSL在中枢神经系统发育的过程中，起到抑制少 突胶质细胞分化的作用。与DSL不同，NB-3能够促进神经干细胞向少突胶质细 胞分化，并促进少突胶质细胞前体细胞成熟。NB-3与 Notch结合后，是通过 Notch/Deltex信号系统来调节 Notch 目标基因的变化的，因为用 dominant negativeNotchl和Deltexmutant能够阻断NB-3的作用。髓鞘相关蛋白MAG 是少突胶质细胞成熟的标志之一，用NB-3处理OLN-93细胞和原代培养的少突胶 质细胞，能够提高髓鞘相关蛋白(MAG)的表达，Notch/Deltex也参与了这一过 程的调节。 许多研究表明，轴突来源的分子能够调节少突胶质细胞的成熟和髓鞘的形 成。NB-3是由神经元表达的一种轴突分子，在大鼠胚胎 17天的神经系统开始表 达，出生后7天至21天达到最高水平。这一表达时间框与少突胶质细胞的分化 成熟时间相符和。因而，我们的研究显示，作为轴突来源分子的NB-3在神经系 统发育过程中，通过Notch/Deltex信号系统促进少突胶质细胞的分化和成熟， 同时在治疗脱髓鞘疾病方面有应用前景。 关键词:NB-3,Notch,Deltexl，神经干细胞，少突胶质细胞，分化 一 一 .- ..臼..一 一 .- ..~.~~~...~ .~- 一 一 I 一 — 哈尔滨医科大学博士学作论文 — . Abstract Oligodendrogliasarisefromneuralprogenitorcellsviaaseriesof differentiation stepsand eventually result in thematuremyelinating phenotype.Previousobservationsdemonstrate that F3/contactin isa functionalligandofNotchduringoligodendrocytematuration.Here,we establishNB-3,amemberofF3/contactinfamily,asanovelNotchligandand demonstratethatthisinteractionparticipatesinthisstepwiseprocess. AsaligandofNotch, NB-3caninteractwithNotchextracellulardomain onEGF22-34repeat.Thisinteractiontriggersnucleartranslocationofthe Notchintracellulardomaininbothprogenitorcellsandtheoligodendrocyte celllineOLN-93whichcanbeblackedbyani-NB-3antibodyandY一secretase inhibitor. These results demonstrate that NB-3 induces Y-secretase-dependentNotchlRIPattheS3site. Differentfrom