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2018-01-09 发布于浙江
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人骨关节炎软骨细胞的体外培养

第# 卷第期武汉大学学报（医学版） ;/- # =/ ! $$% 年月 ’()*+,- ./012,- /3 405,2 62*7(18*9: ’,1 ，$$% 人骨关节炎软骨细胞的体外培养 ? ? 秦! 俊 ! 陈廖斌 ! 汪! 晖! ’,C),-/0 .,D0(8 ? 武汉大学中南医院骨科；武汉大学医学院药理学系! 湖北! 武汉! @$$% ? 法国南锡第一大学药学院! 南锡! E@$ ? 摘要! 目的：对人骨关节炎软骨细胞的分离、消化和培养进行初步研究，并就其生物学活性同人正常软骨细胞进行比较和评价。方法：以含血清培养液配制的$ $EF 和$ F 型胶原酶顺序消化关节软骨分离细胞，检测细胞 ! 存活率；体外传代培养观察细胞形态、生长、增殖和型胶原、蛋白多糖聚集体等的变化，以及用流式细胞仪检测有 ! 或无GHB? 诱导的细胞凋亡和周期变化。结果：消化后骨关节炎组原代细胞活力平均为#F ，少于正常组的 # AEF （! I $ $?）。 ’JJ 检测骨关节炎组细胞增殖低于正常组（! I $ $?），型胶原免疫组化和甲苯胺蓝K 异染 $ ! 反应均较弱，传至第@ 代软骨细胞生物学特性基本消失。骨关节炎组细胞凋亡率为 AF ，而正常组为$ EF ， % GHB? 诱导后凋亡率增加了% @ F ，正常组只有? %F 。结论：酶二步消化法具有较高细胞存活率、低污染率和操作简便等特点，分离培养的骨关节炎软骨细胞符合人患骨关节炎时软骨细胞退变的表现，能很好的为骨关节炎细胞水平的研究提供最佳实验对象。关键词! 骨关节炎；软骨细胞；细胞分离；细胞培养；细胞凋亡中图分类号! L#@ ! 文献标识码! M! 文章编号! ?% ?B##E（$$% ）$B$?AB$E !#$% ! #!$% ’( )*+, -.$’+%$/%0$0. !/’,1%’23$. 456 7,? ，!)86 90+’:0,? ，;6= )0 ，+?1+#’ 7+@. ?#$ % ’( )*%+’$ #,-./ ，0+’12131 4’/$ -%35 ’( 67+31 81-9#*/-%: ，67+31 ;==? ，@+-13 #$ % ’( !+3*A3.’5’2: ，B.+’’5 ’( C#,-.-1# ，67+31 81-9#*/-%: ，67+31 ;==? ，@+-13 B.+’’5 ’( !+3*A3.: ，81-9#*/-%D 4#1*- !’-1.3*DEF31.: ?，F31.: G;=? ，H*31.# :.$%+