纺织清洁生产用过氧化氢酶发酵生产条件及酶学性质研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 纺织清洁生产用过氧化氢酶发酵生产条件及酶学性质 冷晒祥2， 华兆哲2， 堵国成1’2， 陈 坚1’2‘ (1．江南大学工业生物技术教育部重点实验室．江苏无锡214036， 2．江南大学生物工程学院环境生物技术研究室，江苏无锡214036) 摘 要：为了节约工业化生产成本，考察了不同工业级氮源对一株嗜热子囊菌发酵产过氧 化氢酶的影响，结果表明，以0．076 g／L鱼粉和0．038g／L蛋白胨为混合氟源时，过氧化氢酶 酶活达到1858u／mL，基本能达到以0．076g／L蛋白胨为氮源时的过氧化氢酶的活力，使得 原料成本降低了近40％．探讨嗜热子囊菌的过氧化氢酶高温和强碱性的的稳定性的结果表 明：酶在pH在7--,14区域稳定，而在pH15时酶失活．酶在85℃处理30min酶活基本稳 定，而在高于90℃酶快速失活。产自嗜热子囊菌的过氧化氢酶在纺织染整工艺中具有良好 的应用潜力． 关键词：过氧化氢酶，嗜热子囊茵，稳定性，应用，工业化 就开始广泛应用于生物、医药、临床和食品中的某些分析测定，在食品和乳制品工业、纺 织工业、制浆和造纸工业、医疗器械的消毒、葡萄糖酸的生产等方面也有越来越多的应 用r副。 近年来，随着绿色环保意识与要求的不断加强，在染整工艺中利用酶替代传统的强 碱高温工艺对棉织物进行前处理已成为大势所趋。CAT在棉织物前处理过程中的主要 作用是去除织物漂白废液中残余的H：O。，以免给后续染色工序带来问题。应用CAT实 现漂染同浴，不仅能节省大量的水、电、汽的消耗，提高生产效率，还能减少废水的排放， 有利于环保。但是，现有商品CAT在高温和强碱性环境下易失活，限制了CAT在染整 工艺中的应用[t’5]。 近20年来，关于嗜热菌[6’7]产生CAT的报道陆续出现，特别是嗜热子囊菌所产的 CAT是迄今为止已报道过的热、碱稳定性好的CAT，为开发耐热耐碱的CAT提供了可 能。 aurantiacusWSH 03-01)，该菌株发酵生产的CAT酶活较高，而且对热和碱的稳定性都 较好，在纺织清洁生产中具有良好的应用潜力。为了适应工业化生产的条件，本文在上 述实验室研究的基础上，采用工业级氮源替代原先的试剂级氮源，在7L发酵罐上考察了 作者简介：*责任作者．Tell0510-Faxl0510- E--mailljthen@sytu．edu．cn 690 第四次全国发酵工程学术讨论会 其发酵生产CAT的可行性，并对粗酶的性质做了初步的研究为今后在染整工业化中的 应用提供了可能。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1菌种 aurantiacusWSH 03一01)WSH 金黄色嗜热子囊菌(Thermoascus 03一01，江南大学生 物工程学院环境生物技术研究室保藏。 1．1．2材料与仪器 L(KoreaFermentorCo．，Ltd，韩国)。 全自动发酵罐KFT-7 1．1．3培养基 斜面培养基PDA(每支茄式瓶)：5度麦汁50ml，琼脂lg，pH6．0。 种子培养基(g／L)：玉米淀粉15，蛋白胨4，酵母膏4，K：HP0。1，Na。HPOl 1，Mg— S04·7H205，pH6．8。 KH2P04·3H20 2，微量元素液2 8．0。 3，MgSO‘·7H20 mL，10ml乙醇，pH 6，Ca