路路通药材中桦木酮酸定性定量方法的研讨.pdfVIP

路路通药材中桦木酮酸定性定量方法的研究 张启伟 张永欣 孙玉茹 张 东 (中国中医研究院 中药研究所 北京 100700 ) [摘要] 目的:建立路路通药材中桦木酮酸的鉴别及含量测定方法 方法: 薄层色谱法鉴别 药材用醋酸乙酯提取 在以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上 用石油醚(60-90) 丙酮(173)展开,磷钼酸显色 高效液相色 谱法进行含量测定 样品用无水乙醇超声提取 Diamonsil C柱,甲醇- 水- 冰乙酸 (87:13:0.1) 为流动相, 流速 18 -1 -1 1.0mlmin ,柱温35,蒸发光散射检测器蒸发管温度82 气体流速 1.25Lmin结果:薄层层析鉴别重现性好 在上述液相色谱条件下 桦木酮酸获较好分离,进样量在 0.65- 3.25g范围其对数与峰面积对数呈线性关系( r =0.9997),加样回收率为98.0%,重现性为2.5%对收集的 11批商品药材进行了定性鉴别和含量测定 结论: 本研 究为路路通质量标准的建立提供可借鉴的方法 [关键词] 路路通 ;桦木酮酸 ;定性定量 薄层色谱法 高效液相色谱法 [1] 路路通为常用中药 主要用于治疗风湿痹痛,肢体麻木 湿疹,乳少经闭 ,脘腹疼痛 有关路路通 化学成分方面的报道较少 主要有桦木酮酸(betulonic又称路路通酸acid) [2,3,4] acid路路通内酯 齐墩果酸 熊果酸等多种萜类化合物及挥发油 其中以桦木酮酸含量较高 [5] 经药理实验证明 路路通中桦木酮酸具有明显的对抗四氯化碳和半乳糖胺对肝细胞毒性的作用 有关 桦木酮酸的定性定量方法未见文献报道 在植化和药理工作基础上 我们采用薄层色谱法和高效液相色 谱法 分别建立了路路通中桦木酮酸的定性定量测定方法 为路路通质量标准的建立提供可借鉴的方法 1.仪器 试剂与药材 HP1100型单元液相色谱泵 Alltech 500型蒸发光散射检测器 TL9000色谱工作站 2004MP型电子半微量天平 路路通药材均为市售,经我所生药室胡世林研究员鉴定为枫香树 Hance)的干燥成熟果序 桦木酮酸由路路通分离提取纯化而得,MS,NMR等数据均与文献报道一致 经 HPLC纯度检查,面积 归一化法计算其含量为100%可做含量测定之用 甲醇 GR 纯水,其它试剂均为分析纯 2.方法与结果 2.1薄层色谱鉴别 取药材粉末(过40目筛)0.5g加醋酸乙酯20ml,加热回流45分钟 滤过 滤液浓缩至 1 ml作 为供试品溶液 另取桦木酮酸对照品 加无水乙醇制成每ml含0.1mg的溶液 作为对照品溶液 吸取 上述两种溶液各6 l 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上 以石油醚(60-90 ) 丙酮(173)为展开剂 展开 取出 晾干 喷以:10%磷钼酸乙醇溶液 于 105烘数分钟.供试 品色谱中 在与对照品色谱相应的位置上 显相同颜色的斑点 对所收集的11批药材进行了薄层鉴别 证明该方法可行 2.2含量测定 2.2.1色谱条件 Diamonsil C5m 4.6mm x 250mm柱温 35,流动相为甲醇-水-冰乙酸 18 -1 -1 87:13:0.1流速 1.0mlmin;检测器蒸发管温度82 气体流速1.25Lmin;进样量5ìl 在此条件下桦木酮酸对照品和样品HPLC图谱见图1 t/m