-第三章培养基及其制备培养基是提供微生物生长繁殖和生物2.pptVIP

;第一节 培养基的选择与制备;根据生产工艺的要求可分为: 孢子培养基（ spore medium ）： 制备孢子用的培养基。要求菌种在这种培养基上能形成大量的优质孢子，但不能引起菌种的变异。该培养基的基质浓度（有机氮）要低些，否则影响孢子的的形成。无机盐要适量，否则影响孢子的数量和质量。 　 常用的有麸皮、大（小）米，由葡萄糖、无机盐、蛋白胨等配制的琼脂 斜面培养基。 种子培养基（ seed medium ）： 供孢子发芽和菌体生长用的培养基。营养成分应是易于被菌体吸收利用，且完全丰富。其中N源和维生素的含量应高些，但总浓度以略稀薄为宜，以便菌体生长繁殖。为使培养的种子能较快适应发酵罐内的环境，在设计种子培养基时要考虑与发酵培养基组成的内在联系。; 　　发酵培养基（fermentation medium）： 供菌体生长和合成大量代谢产物用的培养基。 　　要求此种培养基的组成丰富完整，营养成分浓度和粘度适中，即利于菌体生长，又利于合成大量的代谢产物。 　 发酵培养基的组成要考虑菌体在发酵过程中的各种生化代谢的协调，在产物合成期，使发酵液pH值不出现大的波动。 　　不同的菌体，不同的产品，对培养基的要求是不同的。不同的发酵产品，培养基的状态、粘度、各成分的含量也是不同的。但是，基本的营养需求是一致。因此，应根据不同的情况选择发酵培养基。 ;二、培养基选择的依据; 三、发酵培养基选择的原则： 1．必须提供合成细胞和发酵产物的基本成分。 　 2．有利于提高培养基中产物的浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力。 3．有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。 4．尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化． 5．有利于减少培养基原料的单耗。(合成单位数量的产物所消耗的营养物质的量）,以提高转化率。 6．原料价格低廉，质量稳定，取材容易。 7．所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，利于提高氧的利用率降低能耗，并尽可能减少产生“三废”的物质。; 实际生产中需根据具体情况，抓主要环节。使其即满足细胞的营养要求，又能获得优质高产的的产品，同时也符合增产节约，因地制宜的原则。 　 发酵培养基的主要作用是为了获得预期的产物，应根据产物特点来设计培养基。 发酵培养基必须提供微生物生长繁殖和产物合成所需的碳源、氮源、无机元素、生长因子、水和氧气等。 　 对于大规模发酵生产，除考虑上述细胞的需要外，还必须重视培养基原料的价格和来源。 Q：能作为发酵培养基碳源、氮源的物质有哪些？; 培养基成分配比的选择 培养基： 组分（包括这些组分的来源和加工方法） 配比 缓冲能力 粘度 消毒后营养破坏的程度 原料的杂质含量 对菌体生长和产物形成有影响。 　　目前只能在生物化学、细胞生物学等基本理论指导下，参照前人所使用的较合适于某一类细胞的经验配方，再结合所用菌种和产品的特征，采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备，对C、N、无机盐和前体等进行逐个单因子试验，观察这些因子对菌体生长和产物合成量的影响。最后再综合各因素的影响，采用正交试验或均匀设计得到一个适合该菌种的生产配方，以获得高产。;四、配制培养基应注意的问题 １．考虑碳源、氮源时，要注意快速利用碳／氮源和慢速利用碳／氮源的相互配合，发挥各自优势，避其所短。 ２．选用适当的碳氮比。 　　C源 做为C架又做能源，碳源较氮源多。　 　 过多，容易形成较低pH。 　　　 不足，菌体衰老和自溶。 N源 作营养和氨基的来源 　 过多，菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利 于代谢产物 的积累。 不足，菌体繁殖量少，从而影响产量。 ; 碳氮比不当，还会影响菌体按比例地吸收营养物质，直接影响菌体生长和产物的形成，菌体在不同生长阶段，对其碳氮比的最适要求是不一样的。 根据元素组成：酵母菌的碳氮比约为100?20；霉菌的碳氮比约为100?10。 一般发酵工业的碳氮比约为100 ? 0.2~2.0，但在氨基酸发酵中，碳氮比就高。如谷氨酸