四环素对兔OA中NO+iNOS+MMP1含量影响的实验研讨.pdfVIP

武汉大学 硕士学位论文 四环素对兔OA中NO iNOS MMP-1含量影响的实验研究 姓名：何炳书 申请学位级别：硕士 专业：骨外科 指导教师：刘世清;彭昊 摘 要 骨关节炎 (OsteoarthritisOA)是中老年人常见多发病之一，它严重危害中老 年人的身体健康和生活质量。此病呈慢性经过，且反复发作，以关节软骨的退变 为主要病理特点，骨关节的反复疼痛，肿胀为主要临床表现。但 OA的发病机制 目前还不是很清楚，并且无有效的药物治疗，全球每年用于临床 OA治疗的费用 相当高昂。因此，探讨OA的发病机制和发现有效药物来防治OA已成当务之急， 并具有重要社会经济价值。近年来，基质金属蛋白酶 (MatrixMetalloproteinases MMPS)能降解软骨细胞外基质已得到公认，在软骨退变中倍受关注。它有很多亚 型，其中MMP-1与关节软骨的降解关系最为密切。一氧化氮 n〔itrixoxideNO) 通过激活基质金属蛋白酶，加重关节的炎症反应，加速软骨细胞凋亡而成为近年 研究的热点之一。病理状态下高浓度一氧化氮都是由诱导型一氧化氮合酶产生的; 基质金属蛋白酶和诱导型一氧化氮合酶 (induciableNOsynthaseiNOS)都是钙离 子依耐性的，而四环素类药物是二价金属离子鳌合剂，通过鳌合钙离子而使基质 金属蛋白酶和一氧化氮合酶不能被激活，能使关节软骨的损伤减轻。正是在这样 的研究背景下，我们对四环素的骨关节炎防治作用进行了部分研究。主要为以下 方面 1兔前交又韧带切断 (ACLT)骨关节炎模型的建立 目的:观察兔前交叉韧带切断 (ACLT)后股骨骸软骨形态的病理改变，为构 造()A模型进行药物防治的研究提供依据。方法:日本大耳白24只，分成二组， 正常组，对照组，对对照组行右后腿前交叉韧带切断 A〔CLT)，正常组空白对照。 分别于术后4周8周处死，观察兔膝关节股骨散关节面的大体改变和股骨裸关节 软骨细胞光镜下的病理改变。结果:正常组软骨光滑透明，ACLT组4周股骨裸出 现糜烂，纤维组织增生，光镜下软骨细胞排列紊乱，蛋白多糖染色减退:术后 8 周，上述病理改变进一步加重。结论:ACLT造模术后兔关节软骨符合OA的病理 变化，并随着时间的延长，软骨退变加重，造模成功，适合做进一步的研究。 关键词:骨关节炎 前交叉韧带切断 2NO.iNOS,MMP-1在ACLT模型兔关节液中的表达 目的:研究兔ACLT模型中NO,NOS和MMP-l在关节液及关节软骨不同时 期的表达情况。方法:日本大耳白24只，分成二组，正常组，对照组，对对照组 行右后腿前交叉韧带切断 (ACLT)，正常组空白对照。分别与术后4周8周处死， 抽取关节液做iNOS,NO的检测:取股骨解软骨作MMP-l的免疫组化的检测。结 果:对照组关节液NO,iNOS明显高于正常组 (P0.01);并随着造模时间的延长， 表达量逐渐升高。在正常软骨中未见MMP-1的表达，在模型组中4周可见MMP-l 的表达，主要位于软骨表层及中上层，8周时表达量仍持续升高。结论:NO,NOS 和MMP-l在骨关节炎软骨的退变中起这重要的作用，它们在()A中都有很高的表 达量，适合作为OA防治的评价指标。 关键词:一氧化氮 一氧化氮合酶 基质金属蛋白酶-1 3 四环素对兔ACLT撰型关节液中NO.iNOS. 表达的移响 目的:观察四环素灌胃后对兔前交叉韧带切断 (ACLT)的骨关节炎模型中 NOiNOS和MMP-1表达量的影响。探讨四环素类药物对骨关节炎的作用机理。方 法:12只日本大耳白兔，分成二组，实验组，对照组，对两组动物行右后腿前交 叉韧带切断 (ACLT),实验组术后当天用四环素灌胃，直至术后8周处死，抽取 关节液，作NOiNOS的检测，观察股骨裸软骨的大体改变及光镜下的改变。取股 骨跺软骨作MMP-1的免疫组化检测。结果:通过软骨退变大体评分，实验组软骨 退变明显轻于对照组;NOiNOS和M