男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况研究.docVIP

精品论文 参考文献 男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况研究 湖南省妇幼保健院生殖中心 湖南长沙 410008 【摘 要】目的：探究男性少弱精子症不孕患者的精子DNA碎片的检测分析情况。方法：2013年4月至2015年10月期间，我院不孕不育科接受治疗的少弱精子症不孕男性患者55例作为观察组观察对象，观察同期在我院体检的正常健康男性55例作为对照组观察对象，对患者的精液各项指标分析，同时分析精液中DFI与精子的密度、活动率以及正常形态率和前向活动精子间的分布关系情况。结果：观察组不育症患者的DFI、精子密度、活动率以及正常形态率和前向活动精子指标有显著差异，数据分析符合统计学判断标准（P＜0.05）。在精子DNA碎片指数与精液的常规指标的分布中可见其相关系数分布明显，其DFI指标越高，精液常规指标越差，指标呈负相关。结论：男性少弱精子症不孕患者其DNA完整度较差，可结合其对男性生育能力做相应的评估。 【关键词】男性不育；DNA碎片；少弱精子症 不孕不育是生殖科较为多见的病症，其中男性不育因素占据约50％，临床检查和诊断中应用传统的精液检查是确诊的重要指标，但是其参数都不被世界卫生组织认可[1]。因此在男性不育症的临床诊断中寻求更有说服力的指标非常重要，其中近年来，精子DNA完整性成为研究的热点，其是通过检查反应精子DNA的完整性[2]。本研究对一段时间内我院接受治疗的男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片的观察分析，取得了显著结果，现对此做相关报道。 1 资料与方法 1.1一般资料 2013年4月至2015年10月期间，我院不孕不育科接受治疗的少弱精子症不孕男性患者55例作为观察组观察对象，其年龄在22~40岁，平均年龄为30.4岁，其不育的时长在3~18年，平均为7.2年；选取同期在我院体检的正常健康男性55例作为对照组观察对象，其年龄在22~41岁，平均年龄为30.6岁，其不育的时长在3~17年，平均为7.0年。所有研究对象的染色体检查显示其基因核型均为（46，XY），并且未见Y染色体臂的缺失或者异常。 1.2方法 所有受检者均要禁欲4~5天后进行手淫精液收集，并且待精液液化后结合相应的仪器进行精液各项指标检测和分析，精液在常规分析后进行离心，将精浆去掉，然后加入EBSS进行精子密度的调节，然后取20micro;l进行玻片涂抹，然后在导致显微镜下观察精子的密度，并且做相应调整后放入烤箱中烘干[3]，然后采用伊红液配置好后备用，将精子干燥后采用乙醇半小时固定，然后取出后结合苏木素进行染色，染色持续5min后取出流水冲洗干净，将水滴干后放入伊红染色液中进行持续45~60s的染色，然后进行流水冲洗，玻片干燥后结合树脂封片后进行备查，同时分析精液中DFI与精子的密度、活动率以及正常形态率和前向活动精子间的分布关系情况[4]。 正常精子的判定标准为其精子的头部处于光滑的卵圆形，并且长度在3~5micro;m，宽度保持在2~3micro;m，其头宽和头长呈一定比例，并且顶体占据头的50％~70％，中部呈现细长状态，并且与头的纵轴呈一条直线，其中部的宽度不足1micro;m，并且为头宽的一般[5]；并且其尾部的长度约为45micro;m，并且呈现较为规则的形态，无卷曲情况，比中部要稍微细一些。另外一些处于临界状态的精子均确定为异常，同时其头部接近椭圆，或者伴随有其他缺陷的都确定为异常；异常的精子多为顶体过大、圆形头、顶体过小、梨行头以及不规则形头、长形头以及尾部卷曲等[6]。 1.3采用SCD实验进行精子DNA碎片检测 结合精子Halospem试剂盒进行检测，其步骤严格按照说明书进行，在染色完成后在光镜下进行相应碎片的观察和计算。 1.4统计学处理 本研究中少弱精子症不育男性患者和正常男性的基础资料均采用SPSS22.0软件包处理，计量资料采用平均值表示，计量资料和计数资料的最间对比分别应用t检验和卡方检验，P＜0.05为差异显著的判断标准。 2结果 观察组不育症患者的DFI、精子密度、活动率以及正常形态率和前向活动精子指标有显著差异，数据分析符合统计学判断标准（P＜0.05），详细数据见表1。在精子DNA碎片指数与精液的常规指标的分布中可见其相关系数分布明显，其DFI指标越高，精液常规指标越差，指标呈负相关，详细数据见表2。 3.讨论 有研究显示精子的DNA断裂与男性不育有着很密切的关系，并且决定了胚胎期的发育，在辅助生殖的周期中，DNA的完整性损伤会导致后期的流产和胚胎停止发