试验五土壤中微生物的分离纯化.PPTVIP

实验 土壤中微生物的分离与纯化 实验(二)、 从土壤中稀释分离微生物 一、实验目的： 学习微生物稀释平板计数及划线分离技术 初步观察细菌的菌落形态特征 学习平板菌落计数的基本原理和方法，并掌握其基本技能 二、实验原理 采用适宜（选择）培养基和培养条件，或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长，从而分离获得目标微生物的纯培养：常用稀释平板分离法和划线分离法 分离细菌用牛肉膏培养基，分离放线菌用高氏培养基，分离真菌用马丁氏-孟加拉红培养基。 在固体培养基上形成单个菌落。 依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落，从而推算样品中含有多少细菌、放线菌以及真菌的活菌数目 土壤是微生物生存的大本营，种类和数量及其丰富 从土壤中稀释分离微生物的方法如下： （一）土壤悬液的制备 准备1瓶土壤悬液：称10克土壤放入带玻璃珠的90 ml瓶装无菌水中，手摇振荡(10-20min)，使土样分散。 三、实验步骤： （二）倒固体琼脂培养基平板：(从此步骤开始，在超净台上操作） 取一瓶牛肉膏蛋白胨培养基（350ml左右／瓶） 熔化后，待冷至55-60℃时，倒平板。 (三-1)稀释平板分离法 1、悬液稀释：十倍梯度稀释法，方法见下图： 2、悬液涂布(演示): 无菌操作(从稀至浓将菌液涂布均匀) 采用10－3，10－4，10－5稀释液各0.1ml 涂布牛肉膏蛋白胨平板 (三个稀释