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糖尿病足大鼠行皮肤炎症与正常组织交界处早期离断外用中药治疗后血清中3-NT变化的实验研究
精品论文 参考文献
糖尿病足大鼠行皮肤炎症与正常组织交界处早期离断外用中药治疗后血清中3-NT变化的实验研究
王宽宇 王旭(黑龙江中医药大学 150040)
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)15-0117-02
【摘要】目的 探讨行皮肤炎症与正常组织交界处早期离断治疗方法对糖尿病足大鼠治疗前后血清中3-NT含量变化的影响及其与其他手术方式相比较的优势。方法 建立糖尿病足大鼠实验动物模型,对照1组在皮肤炎症与正常交界处进行离断,断端敞开,加压包扎止血。术后第一日开始,每日进行清洁换药治疗。对照2组:取高位截肢法,断端缝合包扎,每日清洁换药治疗。治疗组在皮肤炎症与正常交界处进行离断,断端敞开,加压包扎止血。术后第一日开始,每日外用中药换药包扎。三组分别在造模前、造模后,治疗后1周、治疗后3周用酶联免疫吸附剂测定的方法(ELISA)检测血清中3-硝基酪氨酸的浓度。结果 治疗组治疗后血清中3-NT含量较高位截肢法与早期离断碘伏换药两组低,有统计学差异。结论 在皮肤炎症与正常交界处进行离断,断端敞开,加压包扎止血,术后每日外用中药换药包扎治疗大鼠糖尿病足在降低血清3-NT含量方面有明显优势。
【关键词】糖尿病足 3-硝基酪氨酸
1 概述
糖尿病足溃疡是糖尿病的常见严重并发症之一。糖尿病的发病率正逐年上升,其并发症足部坏疽日益威胁人类的健康,严重者需截肢治疗,大大影响人们的生活质量。现代医学尚不能完全阐述其病理机制,治疗上多采用控制血糖、抗感染、抗凝、降脂、改善血液循环等方法,坏疽严重者则需要截肢治疗。单纯的中药或西药治疗不能很好的控制坏疽,而目前为保证闭合创面选择高位截肢术,但严重影响人们的生活质量。
本研究的实验治疗方法在保证疗效的同时,尽量提高生活质量,采用早期离断、术后外用中药相结合的方法,可以收到很好的治疗效果。
通过动物实验探讨引发糖尿病坏疽、胰岛beta;细胞的损伤及视网膜病变的多种因子之一的3-NT因子的变化情况,为该病的进一步研究奠定了基础。
目前的实验研究认为,体内高血糖状态会导致体内氧自由基(O2?)、氧化氮自由基(NO?)、过氧化亚硝酸阴离子(ONOO-)、羟自由基等大量增加,氧化应激反应增加,加速了糖尿病各种并发症的发生[1]。氧自由基能与蛋白质结构中的酪氨酸发生硝基化生成3-硝基酪氨酸(3-ni-trotyrosine, 3-NT)[2],可引起蛋白质结构和功能的改变。糖尿病动物模型研究发现,胰腺中存在3-NT阳性细胞,如减少这些3-NT阳性细胞可以阻滞糖尿病的发生发展。硝基化的胰岛素与受体的结合能力下降。
3-硝基酪氨酸是酪氨酸的衍生物,据报道在糖尿病大鼠视网膜内的3-硝基酪氨酸在糖尿病2周大鼠的表达升高,但阳性细胞只分布于神经节细胞层,提示糖尿病大鼠的视网膜损伤首先发生在神经节细胞层。糖尿病20周的大鼠3-NT表达量明显增高,并且阳性细胞遍布视网膜全层,显示随糖尿病病程进展视网膜氧化损伤进行性加重。
总之,动物机体3-NT含量的升高不利于其胰岛素的分泌,不利于创面的修复,亦可加速视网膜氧化损伤。
2 材料
选用健康清洁级8周龄的SD大鼠60只,雌雄各半,以普通饲料单笼喂养,室温18-22℃,自由摄食、饮水。
3 方法
3.1确定溃疡的分级:溃疡按Wagner分级分为5级:0级—完整皮肤;1级—表浅溃疡;2级—深部溃疡(影响软组织):3级—骨髓炎和(或)深部脓肿(包括骨);4级—足前部坏疽;5级—足后部坏疽。
3.2造模:以pH4.6,0.1mmol/L的枸橼酸钠缓冲液溶解链脲佐菌素(STZ),配成1%溶液,以55.0mg/kg的剂量在大鼠左下腹连续注射,每日注射2次,1周后,空腹血糖在12.0mmol/mL以上者入选为糖尿病模型。在糖尿病大鼠右脚跖面用8%冰醋酸棉球足趾按压,每日两次,每次20分钟,1周后形成糖尿病溃疡大鼠模型。
3.3分组:选用溃疡3级以上的大鼠60只,测得空腹静脉血3-NT含量。随机分为3组,每组20只。各组由卡方检验雌雄分配无显著差异(Plt;0.05)。
对照1组采用2%戊巴比妥钠注射液大鼠腹腔注射,麻醉后消毒患肢,在皮肤炎症与正常交界处进行离断(早期离断),断端敞开加压包扎止血,每日进行碘伏换药治疗。
对照2组采用2%戊巴比妥钠注射液大鼠腹腔注射,麻醉后消毒患肢,高位截肢断端缝合包扎,每日清洁换药治疗。
治疗组采用2%戊巴比妥钠注射液大鼠腹腔注射,麻醉后消毒患
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