生物化学基本实验技能训练（一）刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与数据处理.ppt

刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与数据处理 （Volume transfer, accuracy and precision ） 实验目的 了解生物化学实验室规章制度和实验要求 掌握刻度吸管的分类和使用方法，达到稳、捷、准 掌握微量可调式移液器的原理和使用方法，了解可调式移液器的校正方法 建立实验误差、准确度和精确度的概念，掌握误差分析计算方法 了解电子天平的使用方法 生化实验室规章制度和实验要求 1.必须按教学计划规定的时间到实验室，不迟到，不早退。进入实验室必须穿实验服。 2.保持环境的肃静和整洁，不高声说话，严禁用器械及动物开玩笑。 3.严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用。仪器发生故障、损坏、丢失时，应立即报告老师，凡违反操作规程而损坏仪器者，要追究责任。 4.实验过程中要大胆、细心，认真观察实验现象并记录好原始数据；节约试剂，节约水电。 5.实验完毕，洗净所用器材，固体舍弃物(如用过的滤纸、电泳用凝胶条等)切勿倒入水槽内，以免堵塞。须经指导教师同意，方能离开实验室。 6.值日生负责实验室卫生，倒尽垃圾，关好水、电、门窗，经教师检查后方可离开。 试剂使用 1.仔细辨认标签，确定所需试剂及浓度。 2.吸量管与所需试剂号码务必对准。 3.用后盖好瓶盖(切勿张冠李戴)归还原处，以免影响他人使用。 实验考核 生化总成绩 理论考试卷面成绩(60%) 实验成绩(30%) 平时成绩(10%) 实验成绩 平时实验成绩(60%) 实验考试成绩(40%) 平时实验成绩 三部分：考勤(20%) +实验操作(40%) +实验报告(40%) 考勤：迟到 ，扣10分；旷课，本次实验成绩为0分 操作： 不穿白大褂扣10分， 不带实验教材扣10分。 没有预先预习实验扣10分。 实验操作不规范扣5分； 过失造成玻璃器皿损坏扣5分； 过失造成仪器损坏扣10分。 没有清洗玻璃器皿和还原仪器原状扣10分。 没做清洁扣10分。 实验报告的书写 本学期实验内容 生物化学课程网站 访问路径：“三峡大学”-“求索学堂”-“课程总揽”-“医学院”-“医用生物化学” 网站内有理论课和实验课的教学大纲、ppt，习题集，考试方法和考试样卷等，同学们可根据需要下载学习 刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与误差分析 一、刻度吸管(pipette)的分类和操作方法 分类： 10ml, 5ml, 2ml, 1ml, 0.5ml, 0.2ml, 0.1ml（吹?） 刻度吸管的操作方法 1．使用前： 首先要看刻度吸管标记、刻度标线位置等。 2．吸液： 用右手的拇指和中指捏住刻度吸管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中；左手拿洗耳球，将洗耳球内空气排出，接在管的上口把溶液慢慢吸入至刻度以上，立即用右手的食指按住管口。 3．调节液面： 将刻度吸管向上提升离开液面，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止（看刻度时，应将刻度吸管的刻度与眼睛平行），立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出刻度吸管，插入承接溶液的器皿中。 4．放出溶液： 刻度吸管下端紧靠锥形瓶内壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，流完后管尖端接触瓶内壁停留数秒后，再将刻度吸管移去；若刻度吸管上标有“吹”，则需将管内残余液体吹出。 二、微量可调式移液器（micropipette,俗称“加样枪”）的构造和使用方法 微量可调式移液器的规格 用途 规格： 5 ml移液器(1000-5000ul) 1ml移液器(200-1000) 200ul移液器(20-200) 100ul移液器(20-100ul) 10ul移液器(0.5-10ul) 2 ul移液器(0.1-2ul) 微量可调式移液器的构造 微量可调式移液器的原理 1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明. 活塞冲程加样 活塞冲程(空气垫)加样器的结构是空气垫、活塞。空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来；活塞在加样器内作弹簧样运动，通过空气垫带动液体进入吸头中。 移液器的操作方法-1 1. 量程的调节： 千万不要将按钮旋出量程以外（！！！），否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。 移液器的操作方法-2 2. 枪头（吸头）的装配 将加样枪垂直插入枪头（pipette tips）中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。 注意：不要使劲地在枪头盒子上敲，这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。 移液器的操作方法-3 3. 吸液