活性污泥胞外多聚物的提取及化学成分的研讨.pdfVIP

第二届全国环境化学学术报告会论文集 活性污泥胞外多聚物的提取及化学成分的研究 蔡春光蔡伟民 上海交通大学环境学院，上海200240 f 摘要：l通过加热方法提取活性污泥中的胞外多g物(EPS)．实验结果表明，80℃下加热60min，能够比较 完全的提取活性污泥中胞外多聚物而且对细胞破坏最小．采用红外光谱法和紫外一分光光度法分析EPS的 分子成分表明蛋白质’多糖为EPS的主要组成成分’另外还舍有少量的糖醛酸、。NA等物质t1 关键词：胞外多聚物；提取方法；化学成分 0前言 胞外多聚物(Extracelluar polymers简称EPS)是微生物在特定环境条件下产生的高分 子物质，由于在菌体中所处的特殊地位以及其特定的化学组成，使EPS成为决定微生物细胞 表面性质的重要因素。在活性污泥处理系统中它影响污泥的絮凝、沉淀、脱水性能，因而决 定污水处理效果。因此分析EPS的化学组成是理解微生物存在状态的重要基础，也有助于 揭示生物处理的本质。本文采用一种简单有效的方法提取活性污泥中EPS，并对它的主要化 学成分进行了研究。 1材料与方法 1 1实验仪器及试剂 Unico 1000型红外分光光度计测定红外光 UV-2102型紫外一可见分光光度计，Perkin JenamultiN／C 3-18K型高速离心机， 谱，KBr压片。Ana／ylik 3000型TOC分析仪，Sigma 采用试剂均为分析纯。 1 2实验方法 1．21污泥样品中胞外多聚物的提取 活性污泥取自闵行污水处理厂曝气池在30rain内进行提取，摇匀后取污泥样品25ml于 离心管中，在4。Cfbj条件下20009的离心力作用下离心10rain，沉淀物溶解于磷酸盐缓冲液 后，放置于恒温水浴锅中加热提取胞囊多聚物。然后在100009的离一11,力作用下离心30mJn， 所得的上清液过滤后用于成分分析。沉淀物质用于细胞内DNA含量分析。 1 22细胞的破碎 提取胞囊多聚物后的沉淀物溶解于磷酸盐缓冲液中，细胞研磨器研磨后放置于一20℃中 岁7钐 第二届全国环境化学学术报告会论文集 冷冻2hr，然后于沸水中解冻。如此冷冻解冻三次后细胞破碎，在100009的离心力作用下 离心30min取上清液过滤后分析细胞内DNA含量。 1 2．3化学成分分析方法 EPS中多糖的测定采用蒽酮一硫酸法，以分析纯葡萄糖作为标准品。蛋白质测定采用 Lowry方法，以牛血清白蛋白作为标准品Ill。糖醛酸测定采用间羟基联苯一硫酸法 (Blumenkrantzand 法在260nm处测定吸光度。污泥VSS采用标准方法测定…。 2结果与讨论 2 1提取条件的选择 本实验探索最佳提取条件能够比较完全的提出EPS，并对细胞的破坏较小，以防止细胞 内物质对EPS组成成分的影响。从实验结果表1中可知在不同加热温度条件下提取30min时 EPS的TOC、TN、以及DNA含量随着加热温度的提高含量逐渐增大，说明温度升高有利 于EPS的提取。但是当温度升到90℃时提取液中DNA的含量明显增加，这表明细胞破坏 程度明显增大。所以选择80℃作为提取温度。表2中列出800条件下提取EPS中TOC、 TN以及DNA的含量髓加热时间的变化，试验结果表明随着提取时间的延长．EPS的含量 增加。但是当提取时间达到70min时TOC与TN增加不大，DNA的含量增加比较显著，表 明对细胞破坏的程度增加。同时在80C601Tlill下提取EPS中DNA为5．46 mg／gVSS，经过 细胞破碎后测得细胞内DNA为22．32 mg／gVSS。细胞内DNA的含量远远大于EPS中的含 量是EPS中的4，08倍。综合实验结果选取80(260min为最佳提取工艺条件。 表1EPS中TOC、IN以及DNA随提取温度的变化(mg／g、rSS) 2．2EP$的化学结