waters hplc常见故障分析及日常保养知识 PPT.ppt

* Waters? ConnectionsSM HPLC 常见故障分析及日常保养知识 WATERS CAG Waters? ConnectionsSM 能引起HPLC发生问题的潜在因素: 工作环境 电源及地线 流动相 泵 进样器 保护柱 在线过滤器 连接管路 色谱柱 检测器 数据处理装置 操作 Waters? ConnectionsSM 逻辑判断及处理 问题 化学品 环境 机器 *色谱柱/保护柱 *电源 *泵 *溶液 *地线 *进样器 *样品 *温度 *检测器 *湿度 *数据处理单元 *清洁程度 从最简单,容易之处入手: 如 1.停止流速; 2.去掉柱子; ? Waters? ConnectionsSM  系统冲洗 -- 去掉柱子和保护柱 1. 检查反压 - 应该为零或者很小; 2. 进空白 - 基线应无问题; 3. 检查基线状况; Waters? ConnectionsSM 基线问题分析 非周期性噪声 气泡 - 流动相脱气 检测池内有气泡 - 流动相脱气, 检测池后加适当反压 系统有漏液之处 - 检漏并处理 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源 Waters? ConnectionsSM 基线漂移 梯度系统 - 溶剂A于溶剂B的ABS值相差大 - 试用另种溶剂或使用基线扣除法 色谱柱有其他组份被洗脱出 - 冲洗, 直至基线稳定 溶剂发生变化 (如溶入气体或溶剂挥发) - 氦气或脱气机脱气, 溶剂瓶避光,密封(但要 注意防止溶剂瓶内产生负压) 系统有漏液之处 - 检漏并处理 环境温度影响 (尤其对示差,电导,电化学检测) - 室温,柱温,检测池温度控制 反压变化 - 溶剂和样品过滤. 注意黏度过大的样品 Waters? ConnectionsSM Waters? ConnectionsSM 基线周期性波动 温度影响 - 环境温度及检测池温度控制. 注意空调机的影响 溶剂混合不良 - 加装混合器 流动相脱气不良 - 流动相脱气 供电电源的影响 泵不良 - 检修处理 Waters? ConnectionsSM 基线有无规律的尖峰 气泡 - 溶剂脱气 电路接触不良 - 保证清洁, 接线牢固, 接点无氧化 光源灯不良- 检查处理 电噪声 - 去除噪声源 Waters? ConnectionsSM 脱气方法 在线脱气机脱气 氦气脱气 真空过滤脱气 注意: 溶剂应每天脱气 Waters? ConnectionsSM 无样品峰 未进样 泵未工作 漏液 流动相或样品的问题 柱子或保护柱的问题 数据采集装置的问题或其与检测器连线的问题 最简单快捷的检查 - 泵是否工作, 系统是否漏液, 进一针丙酮溶液检查检测器读数及数据单元是否有响应 Waters? ConnectionsSM 负峰 组份的ABS值小于溶剂的ABS值 气泡通过了检测池 对RI检测器不一定是有了问题，很可能是正常的 所有峰都是负峰 - 可能是检测器输出与数据单元连线 极性接反 Waters? ConnectionsSM 峰形不好 - 如峰拖尾, 峰分叉, 出肩膀 在线过滤器(IN LINE FILTER)污染 (通常会伴随有系统压力升高之现象) 色谱柱污染 系统有不正常的死体积- 检查管路连接是否正确- 内径, 接头 保护柱(GUARD COLUMN)污染 溶剂不好或使用不对 样品不好 色谱柱坏了- * PH 2 或 8 会破坏柱子内的填料 * 流速变化率太大- 操作上应注意 Waters? ConnectionsSM 系统性能 两个要点- 峰保留时间(RT)重现性, 峰面积重现性 RT重现性不好 - 无规律变化 : *流量不稳 - 气泡, 漏液, 泵 *温度影响 有规律的变化, 且逐渐趋于稳定 : 系统未充分平衡 RT 重现性好, 但峰面积重现性不好 - *进样量-选用定量管进样时,进样 体积应大于3倍定量管容积; *样品, 气泡;