KJ201701-水产品-孔雀石绿胶体金.doc

附件1 水产品中孔雀石绿的快速检测 胶体金免疫层析法（KJ201701） 范围 本方法规定了水产品及其养殖用水中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于鱼肉及养殖用水中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量的快速测定。 原理 样品中孔雀石绿、隐色孔雀石绿经有机试剂提取，吸附剂净化，正己烷除脂后，加入氧化剂将隐色孔雀石绿氧化成为孔雀石绿，经浓缩复溶后，孔雀石绿与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量进行定性判定。 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。 试剂 正己烷。 乙腈。 冰乙酸。 盐酸。 吐温-20。 氯化钠。 对-甲苯磺酸。 无水乙酸钠。 盐酸羟胺。 无水硫酸钠。 中性氧化铝：层析用，100目~200目。 二氯二氰基苯醌。 氯化钾。 磷酸二氢钾。 十二水合磷酸氢二钠。 饱和氯化钠溶液：称取氯化钠（3.1.6）200g，加水500mL，超声使其充分溶解。 盐酸羟胺溶液（0.25g/mL）：称取2.5g盐酸羟胺（3.1.9），用水溶解并稀释至10mL，混匀。 乙酸盐缓冲液：称取4.95g无水乙酸钠（3.1.8）及0.95g对-甲苯磺酸（3.1.7）溶解于950mL水中，用冰乙