肾康注射液对肾间质纤维化大鼠氧化应激状态的影响.docVIP

精品论文 参考文献 肾康注射液对肾间质纤维化大鼠氧化应激状态的影响 朴明姬（大连大学附属中山医院肾内科 辽宁大连 116001） 　　【摘要】目的 研究肾康注射液对肾间质纤维化大鼠氧化应激状态的影响。方法 采用单侧输尿管梗阻(UUO) 诱导肾间质纤维化大鼠模型，将36 只10 周龄 SD 大鼠随机分为3 组: 假手术组、UUO 组和治疗组（肾康注射液组）。三组大鼠于术后20 天处死，取左肾组织做HE 染色观察和评价炎症程度，检测左肾组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力、丙二醛（MDA）含量，检测大鼠血尿素氮（BUN）和肌酐(Scr)。结果 大鼠行单侧输尿管结扎20 天后, 对照组肾脏病理未见明显炎症改变,UUO 组梗阻侧肾脏明显肿大，肾实质变薄，肾间质水肿，弥漫炎细胞浸润，肾小管扩张或萎缩，肾间质纤维化。与假手术组相比UUO 组肾组织中T-SOD 和GSH-Px 明显下降，但MDA 明显升高。肾康注射液治疗后，肾组织T-SOD 和GSH-Px 活性显著性升高、MDA 含量显著下降。结论 单侧输尿管梗阻可以诱导大鼠肾间质纤维化，氧化应激（OS）参与肾间质纤维化形成，肾康注射液可以减轻肾间质纤维化大鼠氧化应激状态。 　　【关键词】 肾康注射液 肾间质纤维化 氧化应激 　　【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）38-0081-02 　　肾间质纤维化是各种炎症和非炎症性肾脏疾病进展的最终结局，是所有慢性进行性肾脏疾病进展到终末期肾衰竭的共同形态学特点[1-2]。目前认为肾间质纤维化受多方面因素的影响，如蛋白尿、高血糖、高血压、缺氧、药物等。大量资料表明，在各种病因导致的肾间质纤维化过程中， OS 起到重要的作用[3]。本实验以单侧输尿管梗阻模型为研究对象，研究肾康注射液对肾间质纤维化大鼠O S 的影响，以探讨肾康注射液对肾间质纤维化的保护作用及其机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 SD 雌性大鼠36 只，体重200 － 220g（大连医科大学实验动物中心提供)。实验前于本院动物实验中心饲养两周，饲养环境为清洁级。制模型前禁食水12 小时。 　　1.2 方法 　　1.2.1 动物模型的建立与标本收集　雌性大鼠36 只 随机分为3 组（每组12 只）: 假手术组、U U O 组、治疗组（肾康注射液由西安世纪盛康药业有限公司提供）。10％水合氯醛0.4 mL.(100 g)-1 腹腔注射麻醉大鼠，麻醉起效后后行左侧耻骨上切口打开腹腔, 沿左肾下极寻找到左输尿管, 用4.0 丝线上下结扎两处, 然后从中剪断输尿管以防逆行性感染。假手术组大鼠打开腹腔后分离左侧输尿管但不结扎, 随即关闭腹腔。治疗组于术前1d 开始用肾康注射液腹腔注射每天一次（10g/kg, 每支内含生药6g），共计给药20d。假手术组和U U O 组以等量蒸馏水灌胃20d。第20 天各组大鼠腹主动脉取血制备血清, 测定血B U N 和S c r，取一半左侧肾组织, -80℃冰箱保存，取另一半左侧肾组织用10% 中性甲醛溶液固定，石蜡包埋备用。 　　1.2.2 病理学观察 石蜡切片，按常规方法制片后行H E 染色, 光镜观察肾间质纤维化情况。 　　1.2.3 肾组织T-SOD、GSH-Px、MDA 含量测定 黄嘌呤氧化酶法测定左肾组织的T-SOD 活力，直接检测法测定GSH-Px，硫代巴比妥酸（TBA）法测定MDA含量（测试盒由南京建成生物工程研究所提供）。 　　1.2.4 数据x - plusmn;s 表示, 组间差异比较采用SPSS 12.0 软件单因素方差分析，组间两两比较采用q 检验。以P lt;0.05 为有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 肾脏病理改变 HE 染色中假手术组大鼠的肾小球和肾小管结构基本正常，UUO 组梗阻肾脏中可见肾间质水肿、纤维化, 远端肾小管与近曲小管均扩张, 部分萎缩坏死，见大量纤维细胞增生和淋巴单核细胞浸润出现肾间质纤维化, 但肾小球无明显改变。治疗组有轻度肾小管上皮萎缩, 肾小管扩张, 间质中有单核细胞浸润, 肾间质纤维化程度明显轻于UUO 组。 　　2.2 各组大鼠肾功、肾组织的T-SOD、GSH-PX、MDA 测定水平（见表l）。与假手术组比较，UUO 组血BUN、Scr 升高（▲ Plt; 0.05）， T-SOD和GSH-Px活性下降（▲Plt; 0.05），MDA含量升高（▲Plt; 0.05）， 肾康注射液治疗后以上指标明显好转（*Plt; 0.05）。 　　表1 各组大鼠血BUN、Scr、肾组织T-SOD、GSH-Px、MDA 　　含量测定水平(x-plusmn;s) 　　注：与假手术组比较， ▲ P lt; 0.05; 与UUO