真核蛋白质的生物合成(翻译).pptVIP

真核生物蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 氨基酸的活化与搬运 肽链合成 起始阶段( initiation ) 延长阶段(elongation) 终止阶段(termination ) 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。有多种蛋白质因子参与这一过程，称为起始因子（initiation factor，IF） 起始因子 生物功能 原核 生物 IF-1 占据A位防止结合其他tRNA IF-2 促进起始tRNA与小亚基结合 IF-3 促进大、小亚基分离，提高P位对结合起始tRNA的敏感性 真核 生物 eIF-2 促进起始tRNA与小亚基结合 eIF-2B，eIF-3 最先结合小亚基促进大、小亚基分离 IF-4A eIF-4F复合物成分，有解螺旋酶活性，促进mRNA结合小亚基 IF-4B 结合mRNA，促进mRNA扫描定位起始tRNA IF-4E eIF-4F复合物成分，结合mRNA5`-帽子 IF-4G eIF-4F复合物成分，结合eIF-4E和PAB eIF-5 促进各种起始因子从小亚基解离，进而结合大亚基 eIF-6 促进核蛋白体分离成大、小亚基 原核、真核生物各种起始因子的生物功能 （一）真核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； Met-tRNAiMet结合； mRNA在核蛋白体小亚基就位； 核蛋白体大亚基结合。 二、肽链的延长 指根据mRNA密码序列的指导，依次添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位（entrance）或注册（registration） 成肽（peptide bond formation） 转位（translocation） 需要延长因子（elongationfactor， EF ）和GTP的参与 肽链合成的延长因子 原核生物 功能 真核生物 EF-Tu EF-Ts 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP 调节亚基 EF-1 ? EF-1 ?? EF-G 有转位酶活性，协助mRNA-肽酰-tRNA由A位前移至P位，促进卸载tRNA释放 EF-2 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 真核生物延长过程 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 一、识别终止密码 二、诱导转肽酶改变为酯酶活性，相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能 真核生物释放因子：eRF, 识别3种密码子 第二节 蛋白质合成后加工和输送 Post-translational Processing Protein Transportation 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为具有天然构象的功能蛋白。 主要包括 多肽链折叠为天然的三维结构 肽链一级结构的修饰 高级结构修饰 在胞液核蛋白体合成的各种蛋白质，还需要靶 向输送到特定细胞部位发挥生物作用。 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 几种有促进蛋白折叠功能的大分子 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) 1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GreE族 2. 伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族 分子伴侣 分子伴侣是细胞一类保守蛋白质，可