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人教版高二生物必修三-第4章第2节-探究:培养液中酵母菌种群数量的变化-(共25张PPT)
探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 1.单细胞真核生物 2.兼性厌氧菌 3.出芽生殖 探究过程 1.提出问题: 2.作出假设: 3.设计实验: 4.进行实验: 5.分析和表达6.进一步探究 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的? 连续培养7天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度 各小组汇报实验结果,结合实验数据,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。 酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。 实验步骤 ①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀; ③将试管在28℃条件下连续培养7d; ④每天取样计数酵母菌数量; ⑤分析结果,得出结论。 逐个计数很困难,采取抽样检测的方法 每天同一时间计数 酵母菌的计数 (1)计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 血球计数板是一种专门用于计数较大单细胞微生物的一种仪器。 计数室 1mm 血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器 计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3 ,合_________mL。 0.1 1×10-4 1ml = 1cm3 计数室 计数室分为25中格(双线边) 每一中格又分为16小格 计数室是由___________个小格组成 25×16=400 如何计数? 五点取样法 样方法 A1 A2 A5 A3 A4 先将盖玻片盖在计数室上→吸管吸培养液→滴盖玻片边缘→培养液自行渗入→滤纸吸去多余的培养液→酵母菌细胞全部沉降到计数室底部→显微计数→估算试管中酵母菌的总数。 怎样进行酵母菌的计数? .从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么? 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差。 .本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。 酵母菌在不同时间内的数量可以相互对比,不需另设对照实验; 需要做重复实验,以保证计数的准确性。 .需要做重复实验吗? 每个样品一般计数三次,取其平均值。 如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施? 加定量的培养液稀释,再用血球计数板计数 只计数相邻两边及其夹角的酵母菌数。 (计上不计下,计左不计右) 7 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数? 血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复清洗直到干净为止。 血球计数板的清洁 1.对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数※。 镜检注意 2.先用低倍镜、再用高倍镜。高倍镜观察时,需要不停转动细准焦螺旋调焦。 在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌 ?? ?? 个。 2x107 进一步探究: 影响酵母菌种群数量增长的因素 培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关 例2:检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个/mL 解析 :酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数=n/ 80×400×10000×10=5n×105 2.25×16型的计数板 每个中方格可分成16个小方格。一般计数四个角和中央的5个中方格(80个小方格)的细胞数。 细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3 * * * * * * * * * 抽样检测: 5×16=80个小格 抽样检测: 4×25=100个小格 计数室两种规格 1.16×25型的计数板 将计数室放大,可见它含16中格,每个中格含25小格。一般取4个中格(100
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