兰坪铅锌尾矿区豆科植物根瘤菌的多样性及抗性研究精选.pdfVIP

生态环境学报 2012, 21(4): 744-749 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 兰坪铅锌尾矿区豆科植物根瘤菌的多样性及抗性研究 * 王金华，刘绍雄，朱丽丽，李彪，熊智 西南山地森林资源保育与利用省部共建教育部重点实验室，西南林业大学，云南 昆明 650224 摘要：对兰坪铅锌尾矿区自然发生的植物进行调查，共发现 18 种植物，分属于 10 科。对野豇豆（Vigna vexiauata(Linn.)Bench. ）、 长波叶山蚂蝗（Desmodium sequax Wall. ）、三叶草（Trifolium pratense Linn. ）、白刺花（Sophora davii (franch.)Skeels ）、密花 序黄芪（Astragalus forrestii Simpson. ）、美丽胡枝子（Lespedeza Formosa (Vog.)Koehne. ）6 种8 株豆科植物根瘤进行根瘤菌 的分离纯化，共得到419 株细菌，经镜检初步确定有94 株为根瘤菌。对其中31 株根瘤菌的淀粉水解、糖发酵等 12 项生理 生化指标进行测定，并以平均连锁法进行聚类分析。结果表明，兰坪铅锌尾矿区31 株根瘤菌在50%的相似水平上可分为6 个类群，其表型特性存在明显差异，同一种植物中可能存在不同代谢类型的根瘤菌，同一种代谢类型的根瘤菌也可与不同植 物共生。抗逆性测定结果表明，菌株（4G.7 、5.4.3、7.4.3 ）对温度、（4A.12 、4G.7 、4G.10 、5.4.3 ）对pH 、（3.7.9、5.4.3 ）对 盐、（3.7.19、4A.12 、6.1.2、6.1.13 ）对抗生素有较强耐受性或抗性，大多数菌株能在较宽的温度、盐度和pH 范围内生长。 关键词：铅锌尾矿；根瘤菌；分离；多样性；兰坪 中图分类号：X176 文献标志码：A 文章编号：1674-5906 （2012 ）04-0744-06 兰坪，被誉为“云南有色金属王国明珠” ，铅锌 一步筛选优良的抗性菌株和建立高效豆科植物－ 尾矿区规模大，重金属污染严重，亟待生态恢复。 根瘤菌共生固氮体系，解决尾矿重金属污染、改良 目前，研究豆科植物作为重金属尾矿区生态修复的 尾矿土壤、恢复尾矿植被提供种库和有效途径。 先锋植物已经成为热点[1-3] 。豆科植物之所以在废弃 1 材料与方法 地植被恢复中能够起到促进氮素循环和累积的作 1.1 采样地情况及供试植物样本 用，是由于它能与根瘤菌共生，从而有效地将大气 采样地为云南省怒江傈僳族自治州兰坪县金 中的氮气固定。根瘤菌－豆科植物共生固氮体系是 顶镇金顶铅锌矿区尾矿(东经99°32′，北纬26°41′) ， 已知固氮能力最强的生物固氮体系之一，能有效促 土壤为砂壤土，海拔 2 290 m ，植被发育不完善。 进植物生长，增加土壤肥力[4-5] 。因此，发现新的根 对兰坪铅锌尾矿堆积库兰坪哨上尾矿坝南坡、北坡 瘤菌资源，建立高效的共生体系是尾矿区植被恢复 自然发生的植物进行全面调查，植物调查情况见表 的首要工作。 1，兰坪尾矿区自然定居的18 种植物分属于 10 科， 随着根瘤菌资源的不断发现和新研究技术的 其中豆科植物6 种，是尾矿区植被的优势成份；其 使用，根瘤菌多样性研究取得了新的进展。目前， 次为菊科，共有4 种。这与禾本科植物为优势种群 世界范围内对于根瘤菌的调查已发现 43 个种，主 的华南铅锌尾矿区有明显的差异[9] 。这种矿区植被 要分布于 α－proteobacteria 亚纲，此外还有在β－ 特征可能是由于各尾矿本身的理化性质及重金属 [6-7] proteobacteria 亚纲发现 ，已由原来的2 属4 种 类