柠檬酸镱诱导肝癌细胞HepG2凋亡作用及蛋白质-中华预防医学杂志.PDFVIP

·480· 生堡亟随匡堂苤盍!Q!Q生鱼旦筮竺鲞筮!翅垦!垫』￡坚丛盟：地堡垫!Q，y吐丝：盟垒鱼 ．论著． 柠檬酸镱诱导肝癌细胞HepG2凋亡作用及 蛋白质表达变化研究 沈立明 李娜 兰子尧刘琼倪嘉缵 【摘要】 目的研究稀土配合物柠檬酸镱([YbCih]“)诱导人肝癌HepG2细胞株凋亡的作用 及其机制。方法 用DMEM培养基培养人肝癌细胞株HepG2细胞，以DMEM无血清培养细胞为对 照组，以0．01～5．00mmol／L[YbCit2]”无血清培养基培养组为处理组，应用四噻唑蓝(MYr)法检测 [YbCit2]“对HepG2细胞生长的影响；以2．00mmoL／L[YbCih3-无血清培养基培养组为处理组， Hoeehst 33258染色法考察[YbCih]”对细胞的作用，采用差异蛋白质组学及H：02、线粒体膜电位检 测的方法研究[YbCih]”对HepG2细胞作用的可能机制。结果2．00一5．00mmol／L浓度范围内处 理72 h’[YbCih]“能抑制HepG2细胞的生长，半数抑制浓度(Ic∞)值为(2．46±0．23)mmol／L。 2．00 mmol／L[YbCit2]“处理HepG2细胞48、72h，Hoechst 33258染色检测表明其作用是诱导HepG2 细胞凋亡。HepG2细胞经2．00mmo[／L[YbCit2]“处理72h后，通过双向电泳分离和质谱鉴定，鉴定 出14个差异表达蛋白质点，包括丝切蛋白1、过氧化物氧化还原酶6、S100钙结合蛋白A6、蛋白酶26s 非ATP酶亚基13亚型3等在细胞中分别参与抗凋亡、氧化还原、细胞增殖、蛋白降解等过程的蛋白 质。2．00mmol／L[YbCih]卜分别作用HepG2细胞24、48h后，细胞线粒体膜电位检测红绿荧光比值 对照组为2．454-0．28，24h组为1．564-0．23，48 h组为1．16±0．18，与对照组比，差异具有统计学意 4-2．08，24h组为40．00 义(F=23．97，尸=O．001)；胞内H202检测荧光强度对照组为20．00 4-5．50， 48h组为48．00±2．03，与对照组相比，差异具有统计学意义(F=48．40，P=0．000)，表明[YbCih]卜 作用后线粒体膜电位下降，H：02产生增加。结论[YbCih]卜可通过调节胞内氧化应激水平和线 粒体凋亡途径诱导HepG2癌细胞凋亡。 【关键词】镱；稀土元素；细胞系，肿瘤；蛋白质组学 On sHENl| Adifferential theinfluenceof citrateon cells proteomicstudy ytterbium Hel’G2 Jia-zuan． 棚增’，12Na，MJ7、rZi—yao，ⅡuQiong，M ‘Collegeof蜘Sciences，sk凡洳nUnwers妙， Shenzhen51删．China Correspondingauthor：NI^a-zuan，Email：．柳@泓edu．cn To theeffectsof on livercarcinoma exp]ore citratehuman 【Abstract】Objective ytterbium HepG2 celllineandthe mechanisms．MethotisThe cellswereculturedwithDMEMmediumand potential HepG2 dividedinto inthe mediul