电泳 SE600问题解答.pdfVIP

垂直电泳装置SE400, SE600 问题解答指导 %T and %C 的定义 聚丙烯酰胺凝胶的成分通常用两个参数给出： %T = 总的丙烯酰胺浓度= [丙烯酰胺和双丙烯酰胺的重量g / 100 ml] x 100 %C = 总的交联的丙烯酰胺百分比= [双丙烯酰胺的重量g / 丙烯酰胺和双丙烯 酰胺的重量g] x 100 分离胶的丙烯酰胺浓度在 5 到 20% 间，浓度决定了凝胶孔径的大小。对于所有 的凝胶，交联度通常为2.6% 。 浓缩胶的丙烯酰胺浓度较低，因为需要大的孔径。典型的浓缩胶丙烯酰胺浓度为 4% ，交联度为2.6%。 问题 原因和补救 1）有泄漏 1.1）制胶过程中漏胶 1.1.1)玻璃板，隔条，垫圈可能不干净或有 损伤。应确保这些部件彻底赶紧，否则进行 清洗。替换有裂痕的玻璃板。检查垫圈是否 有切口或裂缝。 1.1.2)隔条和玻璃板边缘没靠齐。检查对齐 情况。 1.1.3)夹的过紧。通常旋转90 －150°,最高 180°。在两边的隔条下角处，用胶条密封。 不要使用硅脂。 1.2）缓冲液从上缓冲液槽(UBC) 1.2)检查玻璃板，隔条和夹具是否对齐。用 中泄漏 户不要像 SE260/250 那样使用一块方形玻璃 板加一块带凹口的板子，这样无法和垫圈形 成很好的密封。应使用两块方形玻璃板。 检查垫圈与上缓冲液槽吻合。 检查垫圈没有损坏，是否柔软，有无微小裂 痕。 确保上缓冲液槽没有弯曲变形。上述情况的 发生可能是因为跑胶过程中没有降温而使温 度超过了50℃。 检查橡胶垫圈是否比凹槽顶部略高。如果不 是，取出垫圈检查垫圈直径是否为4.5 mm 。 如有必要换其他垫圈。 1.3）电源检测到漏电 1.3)电路触地。加入更多的硅脂密封散热器 的金属扣。检查散热器是否有裂痕。 问题 原因和补救 2）加样孔被破坏或不规则 2.1)有气泡。在插入梳子前将气泡赶出。倾 斜着将梳子插入。如果需要将梳子拿出，再 次插入前应加入更多的单体溶液。 2.2)不完全或较慢的聚合。允许其交联至少 1 小时。