灵芝多糖提取及性质分析.pdf

北方 园艺2011(06)：43～45 ·研究简报 · 灵 芝 多糖 提 取 及 性 质 分 析 郑 静，韩 宏 义，常 乃 涛，白 鹏 (丹东农科院，辽宁 凤城118100) 摘 要：从赤灵芝子实体原粉 中分离提纯得到 2种均一多糖 GLP1—1和 GLP2—2，并应用 HPLC、SephadexG-100凝胶层析、IR、UV等方法对分离得到的2种多糖进行纯度鉴别、组分测定 及结构分析。结果表明：多糖 GLP1—1是由木糖、)【I半乳糖、I)_葡萄糖、鼠李糖组成，UV光谱和IR 光谱显示GLP1—1和GLP2—2均有多糖的特征吸收，并且具有 吡喃多糖糖基的特征吸收峰；推断 GI 1-1和GLP2—2为 吡喃杂 多糖。 关键词：赤灵芝；活性多糖；构效关系；纯化；凝胶层析 中图分类号：S567．3 1 文献标识码：B 文章编号 ：1001--0009(2011)O6一OO43—03 赤灵芝 (Ganodermalucidum)属担子菌纲 (Basidio— 其浓缩至500mL，5000r／min离心2Omin，收集沉淀，沉 mycetes)多孔菌科 (Polyparaceae)灵芝属 (Ganoderma)的 淀再依次用无水乙醇和乙醚离心洗涤，最后加沉淀置于 一 种药、食两用高等真菌_l】]，别名红芝、木灵芝。研究证 真空干燥器抽真空干燥。 明，灵芝含有多糖、氨基酸、蛋白质 、多肽、甾类、萜类、有 1．2．2 总糖的测定 采用苯酚一硫酸法_l2]。 机酸挥发油、油脂、生物碱、链烷烃以及多种酶和无机离 1．2．3 粗多糖的脱蛋白 采用 Sevage法脱蛋白。 子等。其中灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一 ，与灵 1．2．4 分级沉淀 在粗多糖溶液中边搅拌边滴加冷无 芝的多种药理滑 有关，因此也特别受到医药科技工作 水乙醇。至体积比为 1：3，即乙醇的终浓度为 66 ，置 者的重视 ，研究报导也最多。试验采用水提、乙醇分级 4~C冰箱中沉淀过夜，5000r／rain离心2Omin，分别收集 沉淀的方法得到了2个粗多糖级分，进一步用 DEAE-纤 沉淀和上清液 ，然后将沉淀冷冻干燥 的 66 级份 维素和凝胶渗透色谱反复层析，得到了2种均一多糖 (GLP1)，在上清液中加入冷无水乙醇至 1：3(乙醇终浓 GLP1—1、GLP2—2，并通过多种化学方法及光谱方法对各 度为75 )得到75 级份(GLP2)。 纯化多糖的化学结构及糖链构象进行了初步鉴定。 1．2．5 离子交换柱层析提纯 装柱：将样品装上处理好 1 材料与方法 的DEAE-纤维素层析柱中，以双蒸馏水为洗脱，分布收 集 ，洗脱速度为 24mL／h。苯酚一硫酸法检测。 1．1 试验材料 1．2．6 分离型凝胶柱层析提纯 将样品装上处理好的 赤灵芝 ，购于沈阳于宏区灵芝栽培基地。 葡聚糖凝胶 SephadexCrlO0层析，用双蒸馏水洗脱，用部 1．2 试验方法 分收集器收集 ，每管 ／4min(约2～3mL／管)，收集约 1～ 1．2．1灵芝子实体多糖的分离纯化 灵芝子实体粉的 30管。用苯酚硫酸法测各管多糖含量，合并洗脱峰各管 脱脂：称取灵芝子实体粉200g，加入氯仿 ：甲醇 (体积比 洗脱液，旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥精制多糖粉末 2：1)混和液600H ，置