血清总蛋白的测定.docVIP

精品论文 参考文献 血清总蛋白的测定 刘启瑰 (黑龙江省孙吴县人民医院 黑龙江孙吴 164200) 【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)04-0182-01 【关键词】 血清总蛋白测定 原理 步骤 目的 掌握血清蛋白质测定的方法。 原理 血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH- CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。 器材 分光光度计 试剂 1.6mol/L NaOH溶液称取NaOH240g，溶于新鲜制备的蒸馏水约800ml中，定容至1L，贮于有盖塑料瓶中。 2.双缩脲试剂 称取硫酸铜结晶(CuSO4middot;5H2O)3g溶于新鲜制备的蒸馏水500ml中，加入酒石酸钾钠(NaKC4H406middot;4H2O，用以结合Cu2+，防止CuO在碱性条件下沉淀)9g