水处理生物学-实验指导.pptVIP

四 显微镜的使用与微生物染色 一．实验目的 1．学习显微镜的使用 2．学习微生物的染色原理，染色基本操作， 从而掌握细菌染色的一般方法与Gram染色法 二．实验原理 1．为什么染色 2．Gram染色原理 三．仪器与材料 1 显微镜、接种环、酒精灯、 香柏油、擦镜纸、载玻片 2 草酸铵结晶紫、碘液、95%乙醇、 蕃红染液 3 菌种 四．实验内容 1．准备 (1) 涂片 (2)干燥 (3) 固定 2．染色 (1) 初染： 草酸铵结晶紫，染色1 min，水洗 (2) 媒染： 碘液冲去残水，并覆盖1 min，水洗 (3) 脱色：95%乙醇， ，水洗 (4) 复染：蕃红染液，染色1 min，水洗 滴加20~30s 静置35~40s 3．镜检 吸掉水份，干燥，置于油镜下观察。 G+：紫色 G?：红色 “ ” “ ” 一 培养基的制备与灭菌 一．实验目的 1．熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作 2．掌握培养基的制备方法 3．掌握高压蒸气灭菌技术 二．仪器与材料 1．培养皿(8套)、试管(7支)、锥形瓶(250ml， 1个)、烧杯(300ml，2个) 2．棉花、报纸 三．实验内容 (一)玻璃器皿的洗涤与包装 1．洗涤 2．包装 (1)培养皿 (2)移液管 3．精密pH试纸(6.4~8.4)、10% HCl、 10% NaOH 4．牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水 5．高压蒸气灭菌锅 培养皿的包扎 移液管的包扎 (二)培养基的制备 1．配制溶液 ─────── 2．调节pH值 7.4~7.6 3．分装 4．包扎、灭菌 牛肉膏 0.75 g 蛋白胨 2.5 g NaCl 1.25 g 琼脂 5 g 蒸馏水 250 ml (3)试管及锥形瓶的棉塞 棉塞的制法 二 微生物分离、培养与接种 一．实验目的 1．掌握从环境中分离培养细菌的方法 2．学习几种接种技术 二．仪器与材料 1．无菌培养皿 2．牛肉膏蛋白胨培养基、分装好的试管、 待分离的样品 3．接种环、酒精灯、培养箱等 三．实验内容 (一) 平板划线分离法 1．倒平板 ( + 制作斜面 ) 2．取样及样品的制备 3．划线 4．培养与观察 (二) 稀释平板分离法 平皿开启方法 倒平板方法 平板划线分离法 几种画线方式 稀释平板分离法 10ml 活性污泥 平板划线分离法与稀释平板分离法24h培养后 四．其他一些接种技术 1．斜面接种 2．液体接种 3．液体 液体 4．穿刺接种 斜面接种方法 三 转移培养 一．实验目的 1．将分离到的菌种扩大培养，以供微生鉴定使用 2．掌握斜面接种技术 二．仪器与材料 1．斜面培养基、分离的菌种 2．接种环、酒精灯、培养箱等 三．实验方法 斜面接种 “ ” “ ”