色谱法的原理以及定量分析.pptVIP

２、分离度与柱效能，选择性的关系 ∵n = 5.54 (tR /W1/2)2=16 (tR/Wb )2 ２、分离度与柱效能，选择性的关系 ∴ a:柱效项：塔板数决定，n 越大，柱效越高分离的越好。 ２、分离度与柱效能，选择性的关系 b：选择性项：r2,1越大，tR’（２）与t’R（1） 相差越大，分的越好。 C：柱容量项：k’大一些对分析有利; 太大，tR长，柱容量合适,分的才好。 一般１＜k’ ＜１０ 以n有效表示，则有： 例题： 在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R=1.5 。计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm，柱长是多少？ 解： r21= 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 [r21 / (r21 —1) ]2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（块） L有效 = n有效·H有效 = 1547×0.1 = 155 cm 即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。 第七章 色谱法 7.1 色谱分析法简介 7.2 色谱图及色谱常用术语 7.3 色谱法的基本理论 7.4 色谱定性和定量分析 7.5 气相色谱法 7.6 高效液相色谱法 7.4.1 定性分析 7.4.2 定量分析 7.4 色谱定性和定量分析 §12—4 色谱定性和定量分析 一、定性分析 定性分析的任务是确定色谱图上各个峰代表什么物质。 1.利用保留值与已知物对照定性 （1）利用保留时间定性 在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相同，可能为同一物质。 此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速。 （2）利用峰高增量定性 若样品复杂，流出峰距离太近，或操作条件不易控制，可将已知物加到样品中，混合进样，若被测组分峰高增加了，则可能含该已知物。 （3）利用双色谱系统定性 通过改变色谱条件来改变分离选择性，使不同物质显示不同保留值。例：选用极性差别较大的两种不同固定液来制备色谱柱，不同物质具有不同保留值 2.与其它分析仪器联用的定性方法 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 二、定量分析 气相色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的峰面积或峰高，计算样品中溶质的含量。 mi=fi Ai mi=fihi mi—被测组分i的质量，fi—比例系数 Ai、hi—被测组分的峰面积及峰高 A=1. 065×h×W1／2 A=1.065×h （W0.15＋W0.85）/2 1、定量校正因子 色谱定量分析是基于峰面积与组分的量成正比关系。 但由于同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即不同物质检测器的灵敏度不同，相同的峰面积并不意味着有相等的量。 定量校正因子：单位峰面积对应组分的质量。 fi=mi/Ai fi绝对校正因子 (1)绝对校正因子 绝对校正因子受操作条件影响较大，要严格控制色谱条件，不易准确测定，没有统一标准，无法直接引用，定量分析中采用相对较正因子。 （2）相对校正因子 用一个标准，把所有组分的A较正到标准物的A上，在同一标准上进行比较计算，热导检测器常用苯作标准。 相对定量校正因子fi′定义：样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。 fi′ (m)表示相对质量校正因子 也可用相对摩尔校正因子fi(M) （2）相对校正因子 凡文献查得的校正因子都是指相对校正因子，可用fM′,fm′分别表示摩尔校正因子和质量校正因子 2、定量方法 （1）归一化法 试样各组分都出峰，可用归一化法定量。 把所有出峰组分的含量之和当作100%的定量分析方法称为归一化法。