时间分辨荧光法检.ppt

时间分辨荧光法检测乙肝两对半的优缺点 刘振聪 时间分辨荧光免疫测定 定义 是以抗原-抗体反应与荧光物质发光和时间分辨技术相结合的近代荧光光谱技术。利用镧系元素铕螯合物被激活后产生的特异荧光比一般的荧光长，因此，待短寿命的非特异本底荧光衰退后再测定长寿命阳性荧光信号，成为时间分辨，这是该方法具有极高灵敏度的原因之一，由于时间分辨荧光免疫分析是在荧光免疫分析的基础和结合时间分辨技术后建立起来的一种新的免疫分析技术，故通常将其列入发光免疫分析范畴。 分析原理 异硫氰酸苯甲基DTTA-Eu3+进行标记连接，每个蛋白分子标记50个Eu3+也不影响免疫反应性和稳定性。在双抗体夹心法分析用待测抗原与固相载体上包被的抗体结合，再加入铕螯合抗体，形成双抗体夹心复合物，在酸性增强剂的作用下，复合物上的铕解离形成新的微粒，在340nm激发光照射下，游离出的铕螯合体可发射613nm的荧光，经时间荧光信号接收仪接受其信号强度，传入计算机系统换算成待测物质的浓度单位 探讨既快速、准确又兼顾成本费用、减少假阳性发生率的检测HBVM的方法。方法：血清标本先用ELISA法初筛,阳性者用胶体金试带法复测,复测结果阴性者再用TRFIA法复检。结果：本组881例血清标本经ELISA法、胶体金试带法和TRFIA法三种方法联合检测,发现ELISA法阳性例数、ELISA法阳性者胶体金法阳性例数及阳性实报例数三者两两比较,经t检验差异均有显著性（P〈0.05）。结论：HBVM经三种方法联合检测实报结果较单纯ELISA法或单纯胶体金试带法检测结果更为准确可靠。 优缺点 时间分辨荧光免疫测定灵敏度高，最小检出量可达到10-18mol/ml(普通的荧光免疫技术只能达到1×10-8mol/ml）；分析范围宽，可达4-5个数量级，标记结合物稳定，有效使用期长，测量快速，易自动化，无放射性污染，在灵敏度、稳定性和测量自动化程度等方面都可与放射免疫分析媲美，为目前超微量物质分析最有发展前途的一项技术。 * LOGO 1. 定义 2. 分析原理 3. 临床应用 4. 优缺点 Add your company slogan *