碳水化合物复习资料低聚糖部分第二章 第3、4节 低聚糖的纯化.pdf

碳水化合物化学-低聚糖化学 碳水化合物化学-低聚糖化学 第三节低聚糖的纯化 3.2、由天然植物提取得到的低聚糖(续) 根据低聚糖来源选择分离方法 对于低分子量的低聚糖，用2倍体积酒精沉淀 3.1、由化学改性得到的低聚糖 大分子蛋白和核酸，并用酒精洗涤沉淀物，将收 杂质：初始化学物，副产物 集的酒精蒸发，所得液体浓缩，干燥。 硅胶色谱 对于大分子低聚糖(多糖) （DP20 ），用酒精 结晶 沉淀分离小分子杂质，如盐，氨基酸等；用中性 3.2、由天然植物提取得到的低聚糖 离子交换DEAE纤维素树脂柱分离糖和蛋白(核 杂质：蛋白，核酸，在280nm和254nm有吸收 酸) ，或用蛋白(核酸)酶水解蛋白(核酸) ，然后用2 薄层色谱(TLC) 倍体积酒精沉淀低聚糖。 碳水化合物化学-低聚糖化学 碳水化合物化学-低聚糖化学 根据分离纯化目的选择分离方法 需要收集混合物中不同低聚糖组分 色谱分离方法 需要收集混合物中不同低聚糖组分 活性炭和硅藻土1:1组成的色谱分离吸附柱 柱分离，自动收集器收集样品 凝胶树脂(GPC)、离子交换树脂 活性炭为吸附剂，硅藻土加快流速，可分 离不同聚合度的低聚糖。 不需收集，只需定性或定量分析其含量 薄层色谱 洗脱剂首先用水，单糖被洗脱；然后用乙 高效液相色谱 醇水流洗，乙醇浓度梯度增加能洗脱二糖， 离子交换色谱 三糖和更高聚合度的低聚糖。 碳水化合物化学-低聚糖化学 碳水化合物化学-低聚糖化学 需要收集混合物中不同低聚糖组分(续) 凝胶渗透色谱(GPC) 凝胶渗透色谱(GPC) 柱子： Sepharose CL-2B (Pharmacia Biotech, Piscataway, New Jersey, USA) column (2.6 ×90 cm) Sephacryl S-200HR(Sigma Chemical) 流动相： 0.02% sodium chloride and 0.02% sodium azide(叠氮化钠), 流速：at a flow rate of 20 mL/h. 流出物的检测： The carbohydrate contents of each fraction (5 ml) were