外源基因表达系统的研究进展精选.pdfVIP

Vo l. 6　No. 5　M arch 2006 第 6卷 　第 5期 　2006年 3月 科 　学 　技 　术 　与 　工 　程 　 (2006) 50582 07　 Science Technology and Engineering 　　2006　Sci. Tech. Engng. 综 　述 生物科学 外源基因表达系统的研究进展 郭广君 　吕素芳 　王荣富 (安徽农业大学生命科学学院 ,合肥 230036 ) 摘要 　最近 20 多年来 ,随着重组 DNA 技术的迅速发展 ,对于克隆基因表达问题的研究也日渐深入 ,并积累了 相当丰富的知识 。外源基因的表达系统包括原核表达系统和真核表达系统 ,它们各有优缺点 ,在选择时应 衡量使用 。 关键词 　原核表达系统 　　真核表达系统 　　大肠杆菌表达系统 　　酵母表达系统 　　昆虫细胞表达系统 　　哺乳动物细 胞表达系统 中图法分类号 　Q344. 13; 　　文献标识码 　B ( ) 　　原核表达系统和真核表达系统各有优缺点 。 菌 一般是大肠杆菌 ,通过诱导表达 、纯化获得所 前者是最早被采用 ,也是 目前研究最清楚的表达系 需的目的蛋白[ 1, 2 ] 。其优点是能够在较短时间内获 统 ,其中大肠杆菌表达系统是外源基 因表达 的首 得基因表达产物 ,且所需的成本相对较低 。大肠杆 选 。真核表达系统具有翻译后的加工修饰体系 ,表 菌的遗传背景清楚 ,又由于其具有周期短 、高效率 、 达的外源蛋白更接近于天然蛋白质 。因此 ,利用真 易操作 、使用安全等特点 , 成为外源基因的首选表 核表达系统来表达 目的蛋白越来越受到重视 。 达系统 。 1. 1　大肠杆菌表达载体的类型 1　原核表达系统 表达系统的核心是表达载体 。目前已知的大 肠杆菌表达载体至少有 以下几种 [ 3 ] : 非融合型表 在各种表达系统中 ,最早采用的是原核表达系 达 、融合型表达 、分泌型表达 。若按启动子类型分 , 统 ,这也是 目前掌握最为成熟的表达系统 。该项技 目前广泛使用的大多数质粒表达载体主要是 由 λ 术主要是将 已克隆入 目的基因片断的载体转化细 噬菌体的 P 启动子 、大肠杆菌乳糖操纵子的 lac 启 L 动子 、色氨酸操纵子的 trp 启动子 , 以及 pBR322 质 ( β 2005年 11 月 2 1 日收到 安徽省 自然科学基金 0 104 1106 , 粒的 内酰胺酶启动子等一批强启动子构成的。 ) 0504 10 107 和安徽省重点科研项 目