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VEGF对非小细胞肺癌转归的影响 中国武警医学院附属医院肿瘤中心 穆海玉 前言 肺癌是当今世界上对人类健康和生命危害最大的恶性肿瘤,随着传统化疗进入了一个平台期,靶向治疗引起人们的高度关注。实验显示新生血管生成是肿瘤生长与转移的解剖学和生理学基础,因此研究可能影响肺癌血管生成的因素,寻找有效的抗血管生成药物,可望在很大程度上改变肺癌治疗的现状。研究显示:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)是肺癌血管生成的关键因素。本实验采用SP免疫组织化学方法,检测肺癌组织中VEGF的阳性表达,分析研究它与微血管密度(microvessel density MVD)之间的关系及与临床病理、组织分型和转移之间的联系,以探讨VEGF在肺癌血管生成中的作用。 对象及分组 (1) 肺癌组:共40例,平均年龄52.6岁,其中男21例,女19例。所有患者术前均未接受放化疗。所有标本均重新切片后经HE染色证实为肺癌。其中鳞癌21例,腺癌14例,小细胞未分化癌 5例;高分化20例,中分化7例,低分化8例;Ⅰ期+Ⅱ期21例,Ⅲ期+Ⅳ期14例。 (2) 肺良性病组:共12例,男9例,女3例;平均年龄49.8岁。标本重新切片后经HE染色证实7例为结核球、5例为肺炎。 (3) 正常对照组:共10例,男6例,女4例;平均年龄47.6岁。经HE染色证实为正常肺组织。 方法 所有石蜡标本均行5切片,连续切4片,置60度烤箱内烤30分钟。所有切片分别经二甲苯脱蜡,无水酒精及其它不同浓度酒精脱苯,自来水洗2分钟水化。必选一张切片行HE染色核实病理诊断。采用SP免疫组织化学染色法,按药盒操作规程进行。以PBS代替一抗作阴性对照,用武汉博士德生物工程有限公司提供的已知阳性切片作阳性对照。 结果判定 VEGF表达的判定:镜下癌细胞浆呈棕黄色颗粒状者为阳性,细胞浆呈透明或无色者为阴性,每张切片中观察5个高倍视野〔200×〕, 每一视野记数100个细胞,阳性染色细胞<10%为阴性,≥10%为阳性。 结果1---三种肺组织中MVD分布情况 阳性染色局限于血管内皮细胞膜,呈棕褐色,微血管形态不规则,在癌组织中的分布呈异质性,大多集中在肿瘤边缘。 n MVD 肺癌组 40 20.78 ±5.86 良性组 12 6.83 ±1.23 正常组 10 5.20 ±1.13 P值 P良=0.003 P正=0.002 表1 MVD在三种肺组织中的表达 VEGF着色为棕黄色颗粒,阳性染色主要分布于癌细 胞胞浆中,在肿瘤坏死灶周围尤为明显。肺癌组织VEGF阳性率显著高于肺良性病变和正常对照组。 见表2 结果2--VEGF在三种肺组织中的表达 例数 VEGF+ VEGF- P值 肺癌 40 25 15 P癌症-良性=0.014 肺良 12 2 10 P癌症-正常=0.001 正常 10 0 10 P良性-正常=0.542 表2 VEGF在三种肺组织中的表达 结果3– MVD、 VEGF表达与临床参数之间的关系 MVD与原发肿瘤大小、组织学分级、淋巴转移有关,而与病理分型无关,见表3。 VEGF与原发肿瘤大小、淋巴转移有关,而与组织学分级、病理分型无关,见表3。 临床病理特征 N MVD P VEGF P + - 肿瘤大小 ≤5cm 19 17.16 ± 4.11 0.003 11 8 0.021 >5cm 16 25.63 ± 4.77 14 2 组织学分级 高 20 17.35 ± 4.22
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