mtDNA异质性及其法医学应用..docxVIP

mtDNA异质性及其法医学应用【关键词】mtDNA；异质性【中图分类号】D919．2【文献标识码】B　　【文章编号】1007—9297(XX)02—0140—04　　线粒体DNA(mitochondrialDNA，mtDNA)是惟一　　的细胞核外DNA。人类mtDNA为一裸露的环状双链　　结构，长16569bp，由富含嘌呤的重链(H链)和富含　　嘧啶的轻链(L链)组成。mtDNA编码区的序列相对保　　守，其非编码区长1122bp，又称为控制区。控制区的　　碱基变异相对集中分布在15996～16401nt和29～408　　nt两个区段，分别称为HVI和HVlI。后来，Lutz等【l】　　发现在438～574nt间也存在较多的碱基变异，称为　　HVⅢ。mtDNA呈母系遗传特征，加之其拷贝数多、突　　变率高、抗腐败能力强，具有极高的法医学应用价值。　　个体发育源于一个受精卵，理论上同一个体所有　　的mtDNA序列应是一致的。但实际却发现有少数同　　一个体的mtDNA碱基序列并不完全相同。这种同一　　个体mtDNA出现两种或两种以上的碱基序列的现象　　称为异质性(heteroplasmy)。121其在人体的存在表现为　　同一个体不同组织、同一组织不同细胞或同一细胞不同线粒体之间存在不同的mtDNA序列。一、mtDNA异质性形成的可能机理mtDNA异质性发生机制至今还不是很清楚　　Hauswi~h和Laipis(1982)在研究牛线粒体DNA多态　　性时发现异质性线粒体DNA在卵母细胞和胚胎早期　　发育阶段发生快速分离的现象，从而提出线粒体DNA　　遗传的瓶颈理论。[31后来人们多用该理论来解释mtDNA异质性的形成原理。　　mtDNA异质性的本质是突变．即突变型和野生型　　mtDNA以不同比例共存，其发生与mtDNA拷贝数多、　　不对称复制及缺乏校正修复机制等密切相关。瓶颈理　　论认为：卵母细胞在分化成卵细胞及形成受精卵的过　　程中，卵母细胞和受精卵中数千个mtDNA子集合群　　体(不同序列mtDNA混合)，似通过瓶颈一样的阻塞　　作用而使各个mtDNA子集合群体数量明显减少，只　　有少数mtDNA进行选择性复制，故一种突变基因型　　可以占优势并固定出现在下一代中。Ashley等[41发现　　该“瓶颈理论”结果与人类mtDNA相似，即在单个个　　体中异质性的大小可以改变，子代可以有不同的基因型，仅仅两三代异质性就可以转为同质性。　　共存的突变型和野生型mtDNA通过减数分裂或　　有丝分裂随机分布到子代细胞中，由此细胞中突变型　　和野生型mtDNA比例随之发生随机增减，也称遗传　　渐变，最终，再分裂的子代细胞有向全部为突变型或　　野生型mtDNA。即同质体的方向发展的趋势，该过程　　称为“复制分离”。随着复制分离和遗传渐变的发生，　　一些mtDNA中选择作用不明显的突变建立起同质　　体．并以一定的频率保留于人群中．形成mtDNA某些　　区段的多态性。然而，一些重度突变因复制分离造成　　的同质体个体极易因自然选择而淘汰。因而，多数重　　度突变无法建立起同质体，表现为异质体，异质体在人群中往往只能建立较低频度的多态性。遗传瓶颈出现在卵细胞形成过程中的推测后来　　得到了证实。Bendall等【5I研究了180对双胞胎，其中　　发现4例有异质性。采用遗传渐变理论模式推算，估　　计减数分裂的代间瓶颈大约有2至，100个分子．对于　　特定的母子间传递的mtDNA估计有3～2O个分子　　作者计算人mtDNA—HVI的突变和固定的率在1．2x　　1O～2．7×10-5／每代、每位点之间，相当于1个转位　　突变／2500年至1转位突变／55000年的范围。调查结　　果与其他文献报告基本相符，说明遗传瓶颈相对比较　　狭窄，形成了一种制约因素。调查结果也证实，不同的母系间的瓶颈大小确有差异。　　一个成年人体内mtDNA估计有一兆，mtDNA复　　制聚合酶缺乏忠实性，受精后的细胞发育过程中出现　　变异，形成组织间mtDNA型别差异的可能性的确存　　在。有研究发现原胚层组织异质性是一致的，胎儿各　　组织型别一致，但到了成人，不同组织的异质性分布　　【作者简介】翟仙敦(1977一)，女，山西临汾人，硕士研究生，助教，主要从事法医遗传学研究。Tel：+86—027E—mail：san—mao506163．corn。法律与医学杂志XX年第l3卷(第2期)　　出现差异。Tully等(1998)用DGGE方法检测21名成　　年人不同组织如血、骨、毛发、肝、肌肉，发现异质性出　　现的程度有差异，有的容易检出有的不能检测。研究　　资料显示，在细胞分化、发育过程中，也可有mtDNA　　控制区碱基变异。实验观察组织问异质性的发生存在　　与卵细胞形成过程中类似的