【硕士论文】羔羊下痢病病样中牛病毒性腹泻病毒的分离及其生物学鉴定.pdf

畜牧与饲料科学 内蒙古农牧业科学院百年院庆论文集——— 畜牧特刊 ， （ ）： 2010 31 6-7 195-197 羔羊下痢病病样中牛病毒性腹泻病毒的 分离及其生物学鉴定 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 张国芳 ，任向远 ，扎 纳 ，张恒顺 ，卢 岩 ，糜克永 ，丁清泉 ，董长坦 ，王 蔷 ，张雁滨 （ 内蒙古农牧业科学院动物医学研究所， 内蒙古 呼和浩特 ； 中国科学院武汉病毒研究所， 湖北 武汉 1. 010031 2. 430071 ） 摘要：牛病毒性腹泻病毒感染羔羊已继代到 代，经过临床观察，病毒继代羔羊在感染后逐渐出现软 22 便，肠黏膜脱落，体温上升至40.1～40.8 ℃的一过性低热。 病理解剖观察，肠系膜淋巴结肿大、水肿；右 心室扩张，心内膜出血；小肠黏膜出现肥厚、水肿及轻重不同的充血及出血性炎症，大肠黏膜出现轻重 不同的充血、 出血性卡他性炎性变化，大小结肠水分吸收不全，肠内容物呈软泥样。 对继代试验中每一 代病毒样品作补体结合反应检查，其病毒抗原性逐渐提高，阳性程度由10 倍提高到300 倍。 对不同继 代的病毒样品用BVDV 标准阳性免疫血清进行琼脂凝胶免疫扩散试验检查，出现阳性反应，免疫沉淀 线部分吻合。 以BVDV 制备高免血清，并作补体结合反应检查，说明在羊体内BVDV 的补反抗体存在 一年以上。 关键词：病毒；羔羊下痢；生物学鉴定 中图分类号： 文献标识码： 文章顺序编号： （ ） S852.65 A 1672-5190 2010 06-0195-03 1 材料和方法 胶柱层析， 用TNE 缓冲液平衡与洗脱， 按每管 3 1.1 羔羊下痢病病样来源 mL 收集，收集40~50 管，在紫外分光光度计上于 内蒙古达茂旗白音敖包乡， 个羊群 只病羔 波长处测定光吸收（ 、 ）按管号与相应 2 5 265 nm O D 粪样。 测定的光密度绘制紫外吸收曲线， 对所出现的 3 1.2 BVDV 标准抗原 个波峰，分别测定各波峰是否含有病毒粒子后再 株，农牧渔业部动物检疫所提供。 用聚乙二醇— 方法浓缩或 万 离心 Oregon BVDV 6000 3 r/min 2 的NADL 株，由英国Compton 动物病毒研究所Stott h 备用。 博士赠送。 BVDV 的Danish 株，由瑞典Uppsaia 大 1.5 继代感染初生健康羔牛 学Mreno-Iopez 博士赠送。 将提纯的病羔粪样以生理盐水稀释混合，取