医疗机构临床基因扩增检验试验室工作导则.PDFVIP

附件 医疗机构临床基因扩增检验 实验室工作导则 一、临床基因扩增检验实验室的设计 （一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。原则上 临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准 备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这 4 个区域 在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间 上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空 气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例 如使用实时荧光 PCR 仪，扩增区、扩增产物分析区可合并； 采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析 仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区 的功能是： 1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和 扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存 和准备。 2.标本制备区：核酸（RNA、DNA ）提取、贮存及其加 入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安 全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。 3.扩增区：cDNA 合成、DNA 扩增及检测。 4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂 交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。 （二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因 扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标 本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行，防止扩增产物顺 空气气流进入扩增前的区域。可按照从试剂储存和准备区→ 标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力递减 的方式进行。可通过安装排风扇、负压排风装置或其他可行 的方式实现。 （三 ）工作区域仪器设备配置标准。 1.试剂储存和准备区。 （1 ）2 ～8℃和-20℃以下冰箱。 （2 ）混匀器。 （3 ）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl ）。 （4 ）可移动紫外灯（近工作台面）。 （5 ）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加 样器吸头。 （6 ）专用工作服和工作鞋(套)。 （7 ）专用办公用品。 2.标本制备区。 （1 ）2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。 （2 ）高速离心机。 （3 ）混匀器。 （4 ）水浴箱或加热模块。 （5 ）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl ）。 （6 ）可移动紫外灯（近工作台面） 。 （7 ）生物安全柜。 （8 ）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加 样器吸头（带滤芯）。 （9 ）专用工作服和工作鞋(套)。 （10 ）专用办公用品。 （11 ）如需处理大分子 DNA ，应当具有超声波水浴仪。 3.扩增区。 （1 ）核酸扩增仪。 （2 ）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl ），（视情况定）。 （3 ）可移动紫外灯（近工作台面）。 （4 ）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加 样器吸头（带滤芯）。 （5 ）专用工作服和工作鞋。 （6 ）专用办公用品。 4.扩增产物分析区。 视检验方法不同而定，基本配置如下： （1 ）微量加样器（覆盖 0.2-1000µl ）。 （2 ）可移动紫外灯（近工作台面）。 （3 ）消耗品：一次性手套、加样器吸头（带滤芯）。 （4 ）专用工作服和工作鞋。 （5 ）专用办公用品。 上述各区域仪器设备配备为基本配备，实验室应当根据 自己使用的扩增检测技术或试剂的特点，对仪器设备进行必 要的增减。 二、临床基因扩增检验实验室工作基本原则 (一)进入各工作区域应当严格按照单一方向进行，即试 剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析 区。 (二)各工作区域必须有明确的标记，不同工作区域内的 设备、物品不得混用。 (三)不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜 色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。 (四)实验室的清洁应当按