环腺苷酸拟似物8-cpt-camp诱导骨髓瘤细胞凋亡的研究.pdfVIP

中国癌症杂志 2014年第24卷第10期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.10 755 朱琦 ，医学博士，主任医师，硕士生导师。现任上海交通大 学医学院附属第九人民医院血液科主任，中华医学会上海分 会血液学专科委员会委员，上海市中西医结合血液病专业委 员会常务委员，上海血液学研究所副所长。2003年赴新加坡 中央医院血液病治疗中心担任外籍医师，在血液病，尤其是 恶性血液病的诊断和治疗方面具有较丰富的临床经验。曾先 后主持上海市科委自然基金、上海市卫生局基金和高等学校 青年科学基金等课题多项，并作为主要参与者参加多项国家 自然科学基金面上项目。先后获上海市政府颁发的自然科学 一等奖、上海市医学科技奖一等奖、中华人民共和国教育部 自然科学奖一等奖和中华医学一等奖等奖项。迄今为止已在 国内外核心期刊以第一作者或通信作者发表论文40余篇，其中SCI收录6篇，参编血液 病专著3部。 环腺苷酸拟似物 8-CPT-cAMP诱导 骨髓瘤细胞凋亡的实验研究 杭海芳　王莹莹　朱琦 上海交通大学医学院附属第九人民医院血液内科，上海 200011 　　［摘要］　背景与目的：多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者经标准方案治疗后缓解率虽高，但其 缓解后复发及对化疗药物耐药性的产生较普遍。通过调变细胞内环腺苷酸浓度可以诱导多种肿瘤细胞增殖阻滞 和凋亡，成为肿瘤治疗新途径。本研究观察环腺苷酸拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸 ［8-(4-chlorophenylthio) ’ ’ adenosine 3 ，5 -cyclic monophosphate，8-CPT-cAMP ］对MM细胞生物学行为的影响，探讨其诱导MM细胞凋 亡的可能机制，为开发临床MM治疗新药提供研究方向。方法： 以不同浓度8-CPT-cAMP处理MM细胞系U266，用细 胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8，CCK-8)检测其增殖，流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率和线粒体跨膜 电位的变化，实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-PCR)、 caspase-8 caspase-9 Bcl-2 Bax 蛋白质印迹法(Western blot)分别检测凋亡相关基因 、 、 和 的转录及Bcl-2、Bax蛋 白的表达。结果：U266细胞经不同浓度8-CPT-cAMP处理5 d后，生长受到明显抑制，呈浓度和时间依赖性；伴 μ 随作用时间延长，8-CPT-cAMP的半数有效抑制浓度(IC50)明显减低，第5天可达58.52 mol/L。U266细胞周期 在8-CPT-cAMP浓度增加的状态下逐渐停滞在G /G 期；各浓度组细胞增殖抑制率、凋亡率与对照组相比差异均有 0 1 P 统计学意义( 0.05)。同时8-CPT-cAMP能够诱导U266细胞线粒体跨膜电位下降；此外，经8-CPT-cAMP处理48和 P 72 h后