香菇多糖的提取及活性研究进展.docVIP

精品论文 参考文献 香菇多糖的提取及活性研究进展 1.赛珂睿德生物医药科技（上海）有限公司 上海 201203； 2.中国科学院上海药物研究所 糖化学与糖生物学实验室 上海 200031 摘要：香菇多糖是从香菇中分离纯化的一种主链以beta;-（1rarr;3）-葡聚糖为主、侧链为beta;-（1rarr; 6）-连接的葡聚糖，是以增强T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂，具有通过免疫激活功能发挥抗肿瘤活性等重要的生物活性，疗效好、毒副作用小，在保健食品和药品研发方面具有很好的应用前景。本文综述了香菇多糖的化学结构、分离纯化以及生理活性和作用机制等方面的研究概况。 关键词：香菇多糖；化学结构；提取；纯化；生物活性 多糖来源于高等植物、微生物（细菌和真菌）、地衣和海藻等，是自然界中含量最丰富的生物聚合物，具有能量储存、结构支持、防御功能和抗原决定性等多方面的生物功能[1]。真菌多糖作为药物研究始于20世纪50年代，在60年代以后成为免疫促进剂受到广泛关注，香菇多糖（1entinan，LNT）是研究得较透彻的多糖之一[2]。 香菇[Lentinus edodes（Berk.）Sing]为担子菌纲伞形科真菌，是世界名贵食用菌兼药用菌之一，素有“蘑菇皇后”之称。1968年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6种胞外多糖；1970年Chihard和Sasaki等人证明从香菇中提取出的香菇多糖（一种beta;-（1rarr;3）-D葡聚糖，LNT），并发现它具有明显的抗肿瘤活性[3，4]。自此，香菇葡聚糖广受关注，许多研究者[5-7]发现香菇葡聚糖通过刺激人体免疫细胞（如T细胞，巨噬细胞等），对多种肿瘤细胞具有自然杀伤能力。近十几年，香菇葡聚糖被用作治疗癌症的辅助药物以及提高免疫力的保养品，已受广泛重视。由于长期以来香菇多糖提取产量低、纯化难度大、结构构象及其与生物活性间的关系不明确等，极大地限制了其研究开发与应用。 本文就近年来国内外香菇多糖的研究进行了综述，包括香菇多糖的化学结构、分离纯化、生理活性及作用机制等方面的研究概况，旨在对我国香菇多糖的研究开发和应用有所裨益。 1.香菇多糖的化学结构 天然高分子的化学结构十分复杂，而且不同的化学结构会导致不同的生物活性。目前，已明确香菇多糖的免疫活性与其一级结构有关[8]。香菇多糖的一级结构具有beta;-（1rarr;3）连接的吡喃葡聚糖主链，在主链中葡萄糖的C6位上含有支点（每5个葡萄糖有2个支点），其侧链是由beta;-（1rarr;6）键和beta;-（1rarr;3）键相连的葡萄糖聚合体组成，在侧链上也含有少数内部beta;-（1rarr;6）键的葡聚糖[9]（如图1）。Sasaki等[10]和张俐娜等[11]证明香菇葡聚糖是一种线型的beta;-（1rarr;3）-D-葡聚糖（Lentinan），其分子结构为主链上每5个D-吡喃（gluopyranosyl）残基含两个通过（1rarr;6）键接的D-吡喃残基支链，即每个重复单位含7个残基，侧基总含量为23%。 香菇多糖溶于热水和稀碱溶液，对光和热稳定，具吸湿性。香菇多糖在水溶液或0.9% NaCl水溶液中作为三重螺旋构象，而在二甲基亚砜（DMSO）中以单个柔性链存在[12]。张俐娜等[13-16]还指出香菇多糖在水/DMSO混合溶剂中、NaOH溶液中或者加热至140 deg;C以上，会从三股螺旋链转变为无规线团链。香菇葡聚糖只有在三股螺旋链构象时具有明显的抗肿瘤活性，当转变为无规线团时，其抗肿瘤活性明显降低甚至消失[12]。 2.香菇多糖的分离纯化 2.1 香菇多糖的提取 香菇葡聚糖的提取方法主要有：溶剂法、酶法、超声法、高压法、超滤法等。目前，使用最广泛的是溶剂提取法；另一种是利用超声或者高压破坏细胞壁来提取。最常用的是“水溶醇沉法”，即将香菇子实体或菌丝体破碎，于热水中煮沸4 h进行过滤，滤渣再反复提取2~3次。取滤液加入95%乙醇进行沉淀，离心后取沉淀干燥，即为香菇粗多糖。这种方法由Chihara等人[4]在1969年首次使用，并被沿用至今。2001年，Yap和Ng[17]将从香菇中用热水提取出的粗多糖通过浓缩和乙醇沉淀的方法进行初步的纯化，得到的沉淀再次溶解在碱溶液里，过滤，用酸中和滤液，得到的提取物用氯仿/正丁醇的混合液脱去残留的蛋白质（Sevag法[18]）。热水提取法是目前工业生产香菇葡聚糖使用最为广泛的方法。但使用热水和有机溶剂提取香菇葡聚糖的产率很低，在0.12%左右[19]。最近，张俐娜课题组建立了一种用1.25 M NaOH/0.05% NaBH4溶液从香菇子实体中提取香菇葡聚糖的方法