高效液相色谱法测定芪胶升白胶囊中阿魏酸的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定芪胶升白胶囊中阿魏酸的含量 窦一凡 刘会香 　　石家庄以岭药业股份有限公司 河北 050050 　　摘要：目的 通过高效液相色谱法测定芪胶升白胶囊中阿魏酸的含量的探讨。方法 通过色谱柱、流动相、流速、紫外检测器等方式，来进行芪胶升白胶囊中阿魏酸的含量的测定。结果 通过测定得出芪胶升白胶囊中阿魏酸的含量保持在0．2239～1．1195mu;g的范围内，并且呈现成线性关系，平均回收率达到了98．84%。结论 此种测定方法具有简便、准确的优势，可作为芪胶升白胶囊质量控制的方法。 　　关键词：高效液相色谱法；芪胶升白胶囊；阿魏酸的含量测定 　　一、实验材料 　　1、仪器 　　Agilent1100高效液相色谱仪工作站（美国安杰仑公司），配置G1322A真空在线脱气机，G1312A四元梯度泵，G1329A自动进样仪，G1316A柱温箱，G1315A二极管阵列检测器。 　　2、试药 　　阿魏酸对照品（中国食品药品检定院，批号：110773-201012），其纯度用高效液相色谱峰的面积归一化法计算大于98．0%；甲醇、乙腈（色谱纯，国药集团）；其余试剂为分析纯；芪胶升白胶囊（贵阳德昌祥药业有限公司，批号20120901，纯净水由Millipore净水器（美国）产生。 　　二、方法与结果 　　1、色谱条件 　　色谱柱：岛津C18柱（5020-39001）；流动相：乙腈－（体积分数）0．085%磷酸溶液（17∶83）；流速：1.0mL?min－1；紫外检测波长：316nm；柱温：35℃；进样量：10mu;L；在此条件下阿魏酸峰的理论塔板数为8087。 　　2、流动相的选择 　　通过查阅相关文献，对不同的流动相系统甲醇－（浓度）0．05mol?L－1磷酸二氢钾，乙腈-水，乙腈－（体积分数）0．1%磷酸，乙腈－（体积分数）0．1%冰乙酸，甲醇－（体积分数）0．05%磷酸溶液，乙腈－（体积分数）0．085%磷酸溶液等进行比较，结果发现当用甲醇－（浓度）0．05mol?L－1磷酸二氢钾，乙腈-水为流动相时，分离程度较差；当乙腈－（体积分数）0．1%冰乙酸溶液为流动相时，在316nm波长下对基线干扰较大；而甲醇－（体积分数）0．05%磷酸溶液为流动相分析时间太长，因此，选择乙腈－（体积分数）0．085%磷酸溶液作为流动相；对流动相比例经过不断改进摸索条件，确定乙腈－（体积分数）0．085%磷酸溶液（17∶83）为最佳流动相。 　　3、标准曲线的制备 　　精密称取阿魏酸对照品适量，加（体积分数）70%甲醇适应溶解并定量稀释成含阿魏酸111．95mg?L－1的贮备液。分别精密量取贮备液2mL，4mL，6mL，8mL用（体积分数）70%甲醇定量稀释至10mL，制成对照品，按2．1项下色谱条件进样分析，测定峰面积值（A），并以A对进样浓度（C）进行回归，绘制标准曲线。线性关系考察见表1。回归方程：A=63．199C－561．19，r=0．9987，线性范围：0．2239～1．1195mu;g。 　　 　　4、供试品溶液的制备 　　称取本品内容物6．2448g，置具密封盖的棕色瓶中锥形瓶中，精密加入体积分数70%甲醇20mL，密闭，称定质量；加热回流30min，静置冷却，再称质量，用体积分数70%甲醇补减失的质量，摇匀，静置，取上清液经0．2mu;m微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。重复1次，制备1份平行供试液。 　　5、稳定性实验 　　以对照品溶液连续进样重复测定的结果评价本品溶液的稳定性。取对照品溶液，分别于0h，4h，8h，12h按2．1项下色谱条件测定，阿魏酸峰面积基本不变，ＲSD为0．33%，表明本品溶液在12h内基本稳定。 　　6、精密度实验 　　以对照品溶液连续进样重复测定的结果评价仪器的精密度。取对照品溶液，按色谱条件连续测定5次，结果阿魏酸峰面积的ＲSD为0．2%，表明仪器精密度良好。见表2。 　　 　　7、重复性实验 　　以样品供试液连续进样重复测定的结果评价高效液相色谱法的重复性。按照拟订的含量测定方法，取同批号样品5份，分别制备样品供试液，按2．1项下色谱条件测定5次，结果阿魏酸峰面积的ＲSD为0．1%，表明本方法重复性良好。见表3。 　　 　　8、回收率实验 　　取5份已知含量的样品，分别加入对照品贮备液1mL，按2．3项下方法操作，按2．1项下色谱条件测定，结果见表4。 　　 　　9、空白实验 　　按处方比例称取除了当归以外的其他药材，按制备工艺制成供试液，参照样品测定法测定，在主成分出峰处无干扰。 　　10、样品测定 　　对同一厂家不同批号样品的含量测定结果见表5。 　　 　　三、讨论 　　笔者在制备供试品溶液时，参考了《中华人民共和国药典》2010