高效液相色谱法测定茜芷片中欧前胡素的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定茜芷片中欧前胡素的含量 梁琪 袁才英 王践玲 尹峻岭 （甘肃新兰药药业有限公司 甘肃兰州 730046） 【摘要】目的 建立茜芷片中欧前胡素的含量测定方法。方法 HPLC法测定茜芷片中欧前胡素的含量。采用C18柱，以甲醇-水-乙酸铵（70:30: 0.5）为流动相，检测波长为254nm。结果 欧前胡素在进样浓度0.005～0.050mg/mL范围内线性关系良好（r=0.9992），线性方程为y=702.38x-365.03。平均回收率为98.28%，RSD=1.26%（n=5）。结论　该方法简便、准确，可用于茜芷片中欧前胡素的含量测定。 【关键词】茜芷片 欧前胡素 茜芷片是由茜芷胶囊经改变剂型而成，处方由中药材川牛膝、白芷、茜草等组成，具有活血止血、祛瘀生新、消肿止痛、促进子宫内膜生长等作用。本文依据文献[1]改进了茜芷片中欧前胡素的测定方法，该方法简便、准确，可用于茜芷片中欧前胡素的含量测定，并为标准的修订提供依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Waters 515 型高效液相色谱仪（美国Waters公司），配有515HPLC Pump、2487 Dual lambda; Absorbance Detector，WDL-95工作站（中国科学院大连化学物理研究所）。KH-3000型薄层扫描仪（上海科哲生化科技有限公司），Sartorius CP 225D电子天平（十万分之一）。 1.2 试药 茜芷片（甘肃新兰药药业有限公司，批号；欧前胡素（中国药品生物制品检定所，批号110826-201013，含量99.6%）；甲醇、石油醚（60～90℃）、乙酸铵为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件[2] 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水-乙酸铵（70:30: 0.5）；检测波长：254nm；流速：1.0mL/min；灵敏度：1.00AUFS。 2.2 溶液的制备与测定法 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取欧前胡素对照品10mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解溶解后定容至刻度、作为标准品储备液；再取5mL用甲醇定容至25mL，即得每1mL含0.02mg的标准品溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 取本品（茜芷片）20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于欧前胡素0.05mg），加石油醚（60～90℃）100mL（分3次：50 mL、30mL、20mL），分别超声处理15分钟，滤过，合并滤液，水浴蒸干溶剂，用甲醇溶液并定容在25mL量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。 2.2.3 测定法 精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各20mu;L，按上述色谱条件分别测定，记录色谱图。结果见图-1，A、B、C。 1-欧前胡素 A-对照品 B-阴性样品 C-供试品 图1 茜芷片的HPLC色谱图 2.3 线性关系考察试验 精密量取欧前胡素对照品储备液0.5mL，1.0mL，2.0mL，2.5mL，3.0mL，5.0 mL分别置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件进行分析，每次进样20mu;L，以进样浓度为横坐标，以对照品峰面积为纵坐标，进行回归计算。欧前胡素回归方程为：y=702.38x-365.03，r=0.9992，线性范围为0.005～0.050mg/mL。 2.4 精密度试验 精密吸取欧前胡素对照品溶液20mu;L，连续进样5次，以对照品峰面积为考察指标，RSD为1.29%。 2.5 稳定性试验 精密吸取上述供试品溶液20mu;L，分别在0,2,4,6,8和10h进样，以供试品峰面积为考察指标，以供试品峰面积计算RSD为1.08%。测定结果显示欧前胡素在10h内基本稳定。 2.6 阴性对照溶液的制备与测定 按茜芷片的生产工艺制备不含白芷药材的阴性对照溶液，在上述色谱条件下进样20mu;L，记录色谱图，表明阴性对照溶液对欧前胡素的测定无干扰。 2.7 重现性试验 精密称取茜芷片（批细粉适量，共做5份，按供试品溶液的制备与测定项下的方法进行操作测定。测得含量平均值为0.067 mg?片-1，RSD为1.52%，说明样品测定重现性较好。 2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的茜芷片（批号2011010