龙胆泻肝汤对大鼠体外循环后相关肝损伤保护机制的实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 龙胆泻肝汤对大鼠体外循环后相关肝损伤保护机制的实验研究 黄敬1 杨胜波1 杨帆2 牛刚2 （1、贵阳中医学院 550000；2、贵阳中医学院第二附属医院 550000） 摘要：目的：探讨龙胆泻肝汤对大鼠体外循环(CPB)后肝损伤的保护机制。方法：随机将60 只体重为480plusmn;20g 的SD 大鼠分为对照组（A组）、龙胆泻肝汤组（B 组），每组30 只大鼠，各组大鼠在体外循环后，测定SATA5 活性，全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量。结果：与A 组比较，B 组各时相肝脏组织SATA5 活性明显升高（plt;0.05），血清中谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量明显降低（plt;0.05）。结论：龙胆泻肝汤能对体外循环（CPB）后肝损伤有防治作用，其中，通过提高肝脏组织内SATA5 的活性是其作用机制之一。 关键词：龙胆泻肝汤；体外循环；STAT5 活性；肝损伤；谷丙转氨酶 【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-7165（2015）13-0334-02 体外循环(CPB)是现临床手术中较常见的辅助手段，是手术成功的关键之一，但其有也有很多相关并发症，如体外循环对机体产生强烈应激而导致多器官功能障碍综合征(MODS)［1］，病死率高，其相关的肝损伤是最早及最容易导致的并发症之一，肝损伤发生后甚至可发展成肝衰竭［2-6］等，最终会形成MODS，治愈率大大降低，是导致患者死亡主要原因。有研究表明龙胆泻肝汤具有清热利湿作用，可改善肝脏的生理功能，对体外循环(CPB)后肝脏的损伤有一定保护作用。本实验通过观察龙胆泻肝汤对大鼠体外循环(CPB)后相关肝损伤的防治作用，并探讨其作用机制，现将具体内容报告如下： 1、材料和方法 1.1 动物分组及处理： Sprague-Dawley(SD)大鼠60 只，体重480plusmn;20g，雌雄不限，动物随机分为对照组（A 组）、龙胆泻肝汤组（B组），各组制备成体外循环后0h、1h、3h、6h、9h 和18h 分为6 组，每组5 只。 1.2 药品：龙胆泻肝汤(贵阳中医学院第二附属医院) 1.3 方法： 术前3 周A 组给水喂养，B 组灌胃给龙胆泻肝汤(贵阳中医学院第二附属医院)，术前禁食12h，禁饮6h，术前使用乌拉坦(1mg/kg)腹腔注射麻醉，采用22G 静脉留置针经动脉逆行插入作为动脉灌注管；经右颈静脉将18G 静脉留置针穿刺直至右心房水为静脉引流管。在贮血器和氧合器之间有旁路管道便于排除气泡(Figure2-2,2-3)。预充液总量14-18 ml，其中氧合器和热交换器共8-10ml，其它管道6-8ml。成分：新鲜的同种大鼠血液(8～12)ml(术前由1 只大鼠的颈动脉穿刺抽取并肝素化)、血定安4ml、5％碳酸氢钠2ml、20％甘露醇2ml、肝素钠150IU/kg。各部分连接管道妥善固定后，打开静脉引流端使得静脉血回流到贮血器，然后动脉灌注管，开始转流。转流开始后停止呼吸机辅助呼吸，氧合器供氧(FiO2 1.0)，氧流量与灌注流量比值保持在0.8～1.0，建立并行体外循环，转流时间约120min 后停止CPB。 1.4 检测指标： 各组分别于造模成功后0h、1h、3h、6h、9h 和18h 小时处死5 只大鼠，经下腔静脉无菌取血，肝素抗凝，立即4℃，3000rpm，离心15min，取上清置于﹣70℃冰箱保存，EMSA 法检测SATAT5 相对活性，全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量。 1.5 统计学处理 利用SPSS20.0 统计软件进行统计分析，计量资料均以均数plusmn;标准差（xplusmn;s）表示，组间比较采用配对t 检验，取alpha;=0.05，Plt;0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 各组不同时间点大鼠肝脏组织SATA5 相对活性变化情况（xplusmn;s，n=5）A 组、B 组在CPB 后大鼠血浆ALT(IU/L)、血清 TB(mu;mol/L)含量早期明显升高，3h 后上升到高峰，6h 后缓慢下降，18h 后基本恢复正常，与A 组比较，B 组差异显著，（▲ Plt;0.05，▲▲Plt;0.01）。 讨论 CPB 过程中对器官的保护是外科临床研究中热点领域之一。一直以来，很多专家对 CPB 所导致的除肝脏以外很多的脏器研究很多，而对肝脏却缺乏深入系统研究。肝脏是应激反应的中心器官