酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母 Construction the Recombinant Human Estrogen Receptor (hER)Gene Yeast Using Two-Hybrid Yeast Technique.pdfVIP

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2018-01-29 发布于上海
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酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母 Construction the Recombinant Human Estrogen Receptor (hER)Gene Yeast Using Two-Hybrid Yeast Technique.pdf

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酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母 Construction the Recombinant Human Estrogen Receptor (hER)Gene Yeast Using Two-Hybrid Yeast Technique

第3卷第1期生态毒理学报 V01．3，No．1 2008年2月 AsianJournalof Feb．2008 Ecotoxicology 酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母李剑，马梅’，饶凯锋，王子健中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室，北京100085 摘要：应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母，用以检测类，抗雌激素化合物和环境样品的类，抗雌激素活性．采用多聚酶链反应(PCR)法扩增人雌激素受体(hER)基因，构建诱饵质粒pGBKT7-ERLBD；分别提取并纯化 1．0x10—7mol·L一1．表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品的类／抗雌激素活性．关键词：酵母双杂交；人雌激素受体；重组基因酵母；类，抗雌激素活性文章编号：1673—5897(2008)1—021—06中田分类号：X524 文献标识码：A ConstructiontheRecombinantHuman Estrogen Yeast Yeast UsingTwo-HybridTechnique LI Jian，MAMei‘，RAO Kai-feng，WANGZi-jian State ofEnvironmental CenterforEco-Environmental KcyLal姗tory AquaticChemistry，Research 100085 Sciences，BeUmg Received24November2007 30December2007 accepted Abstract：田recombinanthuman was two—hybrid estrogenreceptor(hER)geneyeast c0删灯删using yeasttechnique．It canbeusedtoscreentheenvironmental witllhER compounds ant／agonisficactivity．’n他yeastexpressionplasmid。 constructedbyPcR theER two were pGBKT7一ERLBD，was amplifying，cloninggene．Otheryeastexpressionplasmids SRCl for extractedand pGAD424．GR口1forERcoac廿vator，GRIPl，andpGAD424 pudficated，including coding coding SRCl．anotherERcoactivator．neYl87werecowansformedwiththe LBDand GRIPl yeast∞lls pOBKT7一ER pOAD424 and or sRCl．andselected on leucine)addedagar． pGAD424