Instruction----领取XuLabcDNA-复旦大学徐彦辉课题组.PDFVIP

Xu Lab Protocol Instruction领取 Xu Lab cDNA 以下要求对本课题组成员及其他课题组 同样适用 1、 说明： a) 本 cDNA 文库为徐彦辉课题组从公司采购。原则是只应限于本课题组使用。为支持其他课题 组的研究，我们愿意与大家分享，但要求该 cDNA 只用于研究，不应用于任何商业用途。因 此在取用该 cDNA 时，请大家签订一份 MTA ，同一课题组将来再取得时候，只需在 MTA 的 电子版中增加对应基因名称即可。所以只需要一份MTA ，最好有电子签名的。 b) 以往的测序结果表明，只有 60%左右的 cDNA 是正确的。会有一部分无法获得正常生长的细 菌；有的有突变，缺失；有的就完全是其他 cDNA 。 2、 领用： a) 请提前联系管理员龚佳蕾预约。如果特殊急需，请通过课题组 PI 与徐彦辉老师直接联系。 b) 在领取前将你所有需要领取的 cDNA 文库的信息在领用前发给龚佳蕾，抄送徐彦辉老师及所 在课题组 PI 。格式为： Plate ( ) Plate ID Plate Row Accessions Gene ID Gene Symbol 领用人 课题组 column IS0001 A 1 BC032736 84240 ZCCHC9 如：李四 （张三老师组） c) cDNA 是在冻存的细菌中，因此在领用前请自行准备最小号（1ml）一次性注射器（领多少个 准备多少个）、培养基（已经自行加好抗生素，本实验室概不提供）、一副干净的手套。cDNA 文库的载体是 pDONR-233 ，抗性是壮观霉素；Spectinomycin。 d) 取用之前，请观看链接 （http://XXXXX ）的视频，熟悉操作方法。不清楚如何操作的，不提供 质粒。取用后请按照 Plate ID 号按排序放回原处 （同一块板的从A01-H12 从小到大排列，Plate ID 从小到大排列）。 3、 领完请务必完成如下三项。不完成的，我们 以后讲不再提供 cDNA。 a) 需要返还一份质粒 （50ul，溶解在 TE buffer 中，测定浓度标注在管子侧面），因为取用后的 细菌有可能会污染，我们也不会再取用。 b) 发送电子版测序结果给龚佳蕾 （gongjialei@ ），格式要求：每一个文件夹包括一个 cDNA 的测序所有结果，文件夹命名为该 cDNA 所在 Plate ID-Plate Row-Plate column ，如 IS0001-A-0 1，再如 IS0004-C-09 ；文件夹中测序文件命名：从 5’到 3’依次命名为该基因名-S 序号，如 TET 1-S1，TET 1-S2…..，再如p53-S1，p53-S2 ）。所有文件夹可打包发送。 c) cDNA 的登记表格。龚老师会在领取 cDNA 的时候发送一份 Excel 表格，请根据模版填写全部 信息，以便其他人再取用的时候参考。在返还质粒管顶端的标记应与第一排的 cDNA 编号一 致。如 10-61，再如 15-09 。请务必填写测序正确与否，如果测序结果不是所要的 cDNA ，是什 么也请标注。为将来可能用到的人提供参考。 联系人：龚佳蕾 （基因文库负责人） 电话 （上午9 点-下午 5 点） 邮箱：gongjialei@ Xu Lab Protocol Plasmid Transfer Agreement PROVIDER (Principal Investi