药品无菌检查OOS结果的调查与分析.docVIP

药品无菌检查OOS结果的调查与分析 OOS(outofspecification,超限度、超规格)结果，是指产品质量指标测试中超出已经建立的可接受标准的单个或一系列结果。无菌产品的阳性结果、微生物限度试验超出行动值或超过规格、内毒素试验结果超标准等均为OOS结果《中国药典》2015年版m和新版《药品生产质量管理规范》（GMP)增加了OOS调查章节，对微生物实验室00S结果的调查做出了较为详细的阐述和实例分析，要求任何OOS结果必须按照书面规程进行完整的调查。因为只有确定了OOS结果产生的原因并判定其是否有效，进而才能制订完善的预防和整改措施，以保证检验结果的准确性。因此，实验室建立OOS调查处理程序，对OOS结果进行科学、及时、有效的调查分析处理是十分必要的微生物在自然环境中无处不在，并可能会随检验人员、检验用器材以及检品的包装容器进入检验环境。因此，关于微生物检验中药品的无菌检査项目，新版药典对其操作环境提出了更高要求，新版GMP也加强了对无菌操作环境空气微生物、表面微生物以及人员手套和操作服表面微生物的监测频率，并做出了明确规定。而对于无菌检査OOS结果的调査，需核实的相关记录和影响因素更为繁杂。基于它的复杂性，OOS结果的调查须追溯到实验过程的每一个环节，而对于它的变异性，调查过程又需针对不同的OOS结果着重分析调查相应的不同环节。brbr对于微生物实验室OOS的调查，局限于每个检验单位的技术水平和资源，同样限于人类对微生物掌握的局限，不是每次的OOS调査都可以发现其根本原因，但通过此调査过程仍能够帮助调查者找出超标结果发生的可能原因并进而采取纠正预防措施，基于风险分析，对相关批次产品做出最后处理决定从而降低药品质量风险，既是保证药品质量的重要工作，又是质量体系持续改进的原动力。本文通过对4批无菌产品的无菌检査实验全过程的回顾性分析和调查，探索导致无菌实验OOS结果的明确原因，以期建立微生物实验室完善的OOS调査方案。br 材料、仪器与试剂br 全自动智能无菌集菌仪（默克MILLIPORE)；一次性使用全封闭集菌培养器（杭州高得医疗器械有限公司）；br显微镜AxioScopeA1(德国ZEISS蔡司公司）；br全自动微生物鉴定仪Vitek2Compact(法国生物梅里埃公司）；br酵母菌鉴定卡（YST,法国生物梅里埃公司)。br无菌检查样品为4个批号的注射用头孢噻膀钠。br 2、方法与结果br 2.1实验方法brbr2.1.1药品的无菌检查br依照《中国药典》2010年版_检验注射用头孢噻肟钠的无菌检查项目。br2.1.2镜检及鉴定br取阳性样本，划线TSA平板培养24~48h，按照仪器及试剂的使用说明，对经过纯化的微生物进行革兰氏染色，确定微生物形态，然后根据形态选择鉴定卡，使用全自动微生物鉴定仪Vitek2Compact进行鉴定。brbr2.2结果brbr4个批号的注射用头孢噻肟钠的无菌检查检验结果如表1所示：2号和4号样品改良马丁培养基均在第3天变浑浊。取改良马丁培养液划线TSA平板，30~35℃培养48h，平板上呈现白色、光滑、边缘整齐、形态单一的菌落。br革兰氏染色镜检结果为酵母菌。经全自动微生物鉴定仪Vitek2Compact鉴定，均为季也蒙假丝酵母。brbr 3、OOS结果的调查和分析br 依据新版GMP对OOS调查的要求，回顾性分析调查注射用头孢噻肟钠无菌检查OOS结果产生的原因。brbr ①日常监控和验收记录：br培养基的验收记录、培养基的制备和灭菌记录、检验器具准备和灭菌记录、消毒液配置和无菌过滤记录、洁净室清洁消毒记录、检验员使用洁净服的灭菌记录和使用记录、无菌检验操作记录以及环境监控记录等均未发现异常。br ②人员：br甲和乙实验人员均能熟练掌握无菌检验的流程、监控要点和无菌操作规范。br ③样品：br确认样品的编号和批号无误，无菌检査取样前，样品西林瓶外观正常，西林瓶盖并未发现松动的迹象。br ④实验器具：br实验中使用的KSF330集菌器、一次件使用无菌注射器以及一次性使用无菌手套的无菌验收均符合规定，且用于当天其他检品的检验，并未发现污染情况。br ⑤培养基及冲洗液和稀释液：br无菌检查用培养基的阴性对照均符合规定，且同批制备和灭菌的培养基用于同日检查的其他检品，并未发现污染情况。br ⑥检验环境：br现场环境监控的3皿沉降菌监测的TSA平皿均未有菌落生长，并未出现污染情况。定期环境检测表面菌符合规定，样品无菌检查当日洁净空调系统均运行正常。br ⑦不同检验体系对结果判定造成的影响：br由于现行《中国药典》无菌检查使用的改良马丁培养基不同于国际标准使用的TSB,将改良马丁培养物划线TSA平板上长出的菌落接种至TSB培养液中in),24h后培养液即出现混浊现象。因此可以排除因检验体系不同造成的