高效液相色谱检测微生物细胞醌类组分的技术规程.docVIP

高效液相色谱(HPLC)检测微生物细胞 醌类组分的技术规程 起草单位：中国典型培养物保藏中心  目 次 前 言 3 1. 范围 4 2. 术语与定义 4 2.1. 菌体真空冷冻干燥（freeze-drying） 4 2.2. 高效液相色谱（HPLC） 4 2.3. 旋转蒸发 4 2.4 保留时间Ret.Time(RT) 4 3. 方法和条件 4 3.1. 试剂 4 3.2. 主要仪器与器材 4 4. 醌样品的制备 4 4.1 收集菌体 4 4.2 破壁 4 4.3 旋转蒸发 4 4.4 纯化 5 5. 高效液相色谱(HPLC)测定醌类组分 5 5.1. 准备工作 5 5.2 色谱条件 5 5.3 结果分析 5 参考文献 6 前 言 醌是微生物化学分类指征之一，它是原核生物原生质膜上的组份，在电子传递和氧化磷酸化中起重要作用。醌主要有两种类型:甲基萘醌和泛醌。在革兰氏阳性细菌和放线菌中主要合成甲基萘醌。醌类组分中异戊二烯侧链的长度和氢的饱和度有重要的分类学意义。 每种细菌都有一个主要的醌类组分，一个微生物群体中醌类种类和数量的不同反映了群体组成的多样性，醌类谱已经作为细菌群体组成多样性的一个指标，在环境微生物中广泛使用。高效液相色谱测定醌类更快速，灵敏度高，操作简单，是一种醌类组分测定的理想方法。 制定本规程的目的在于提供了一种原核生物中醌类提取与HPLC检测