2017选修3《现代生物科技专题》复习提纲(新课用)学生.pdf

选修3 《现代生物科技专题》复习提纲 专题1 基因工程 1.1 DNA 重组技术的基本工具 一、基因工程的概念 （一）概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物 以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA 分子水平 上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。 概念理解： 1、操作环境：体外——关键步骤“基因表达载体的构建”的环境。 2 、操作水平：分子水平。 3、原理：基因重组。 导入 4 、本质：甲(供体：提供目的基因) 乙(受体：表达目的基因) ，即基因未变，合成蛋白质未变， 只是合成场所的转移。、 （二）基本原理和理论基础概括 （如下图） 二、基因工程的工具 （一）限制性核酸内切酶—— “分子手术刀” 1、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（酵母菌中也有） ．． 2 、化学本质：蛋白质。 3、作用：催化作用（可以重复利用），可用于目的基因和载体的切割。 4 、作用特点：每种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA 分子。 注意：识别序列中一般具有回文序列，即在限制酶的切割部位，DNA 分子的一条链正向读 的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 错位切：产生2 个相同的黏性末端，2 个游离的磷酸基团。 5、切割方式 平切：形成平末端，2 个游离的磷酸基团。  EcoR Ⅰ酶：能识别GAATTC 序列，并在G 和A 之间切开。（黏性末端）  Sma Ⅰ酶：能识别CCCGGG 序列，并在G 和C 之间切开。（平末端） 1 【特别提醒】 ①切割的化学键为磷酸二酯键。 ②将一个基因从DNA 分子上切割下来，需要切两处，所以同时产生4 个黏性末端，4 个游离的磷酸基团。 ③在切割目的基因和载体时一般用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。 ．． ④不同DNA 分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA 分子用不同的限制酶切割，产 生的黏性末端一般不相同，但也可能相同，如下列两种限制酶： ．． 限制酶Ⅰ：识别序列和切点是—↓GATC—。 限制酶Ⅱ：识别下列和切点是—G ↓GATCC—。 （二）DNA 连接酶—— “分子缝合针” 1、作用：可以将两个DNA 片段之间的2 各缺口通过磷酸二酯键同时连接起来。 2 、类型： 常用类型 E ·coli DNA 连接酶 T4 DNA 连接酶 来源 大肠杆菌 T4 噬菌体 功能 连接黏性末端 连接黏性末端或平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 3、DNA 连接酶与DNA 聚合酶的比较 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 将两个双链DNA 片段连接 将单个的脱氧核苷酸加到已有 作用 起来，在二者间形成磷酸二 的核苷酸片段上，在二者间形 酯键。 成磷酸二酯键。 模板 不需要 需要 （三）基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车” 最常用载体：质粒 （其本质是小型环状DNA ） 1、类型 其他载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒等 2 、功能：将目的基因导入受体细胞。 3、应具备条件 ①有一个