免疫荧光技术的临床应用PPT.ppt

(三)皮肌炎/多发性肌炎（PM/DM） 免疫学检查 ANA ENA——抗Jo-1阳性 其它检查——肌酶谱 肌酸磷酸激酶（CPK）: MM-心肌和骨骼肌 MB-心肌 BB-平滑肌和脑内 乳酸脱氢酶（LDH） 谷草转氨酶（AST） 谷丙转氨酶（ALT） 碱性磷酸酶（ALP） (四)干燥综合征（SS） ANA——阳性率40%~70% ENA——抗SSA抗体阳性率70%~96% 抗SSB抗体阳性率50%~87% 抗α-Fordrin——对于pSS或sSS的诊断有一 定意义，但特异性和敏感性并不理想。 RF——阳性率75%~100% 高球蛋白血症 WBC下降 (五)系统性硬化病（pSS） ANA——阳性率50%~55% ENA——抗Scl-70阳性率15%~40% 抗着丝点抗体(ACA)阳性 Tankertanker Design 免疫荧光技术临床的应用 天水市第一人民医院 检验科 李杰 随着人们生活水平和意识的不断提 高，各种因素的影响，近年来每31个人 中就有一个人在受到自身免疫性疾病的 折磨，临床表现复杂，不易早期发现。 自身免疫性疾病涉及多学科 （风湿免疫科、内分泌科、血液科、妇产科、皮肤科、肾病科、消化科等等） 自身免疫性疾病涉及多病种 (混合结缔组织病、系统性红斑狼疮、磷脂综合症、原发性系 统性血管炎、韦格纳肉芽肿、坏死性新月体肾小球肾炎、显 微多动脉炎、习惯性流产、干燥综合征、皮肌炎、多肌炎、 原发性胆汁性肝硬化、原发性胆管炎等等） 自身免疫性疾病的共同特征： 患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在，患者组织器官的病理特征为免疫炎症，用相同抗原在某些动物实验中可复制出相似的疾病模型，多数病因不明，疾病有重叠现象，即一个病人可同时患一种以上自身免疫病，病程一般较长，多迁延为慢性，有遗传倾向。 鉴于自身免疫性疾病的共同特征，通过检测自身抗体可以有效准确的诊断自身免疫性疾病，为临床提供高效准确的诊断依据。　　 2 酶联免疫吸附法（ELISA） 1 间接免疫荧光法（IFA Indirect Fluorescent Assay ） 3 免疫印迹法（IB）Westernblot LIA 4 其它：IDA、RIA等 间接免疫荧光法实验原理 细胞、组织切片或纯化的、生化性质明确的物质均可作为检测自身抗体或病原体抗体的抗原基质。 如标本为阳性，已稀释血清中的特异性抗体将与包被在固相上的抗原结合。 第二步，已结合的抗体与荧光素标记的抗人抗体结合，然后在荧光显微镜下观察结果。 阳性标本经系列稀释后可测出其滴度。最适稀释因子为3.162（10的平方根），这样，每隔一步就出现一个10的整数倍数（1:10、1:32、1:100、1:320、1:1000、 1:3200, 1:10000等 间接免疫荧光法检测的特点 特异性高：阳性与阴性标本的荧光强度差别明显。每种已结合的抗体在相应抗原的位置产生典型的荧光模型。 基质中抗原谱完整，可检测多种抗体，并且检出率高。 可在一种生物基质上同时检测多种抗不同生化特性抗原的抗体。 当酶免试剂所需要的抗原难以制备或无法获得时，可选择间接免疫荧光法。 自身抗体检测的标准和最经典的实验方法是间接免疫荧光检测法（IFA)。 需要荧光显微镜。 操作者需要一定的专业知识。 操作者需要一定的工作经验。 显微镜下的结果判断为综合知识的体现，到目前为止，尚没有任何仪器可取代人工读片。 国内现状 自身抗体的测定不普遍 欠规范 对其意义了解尚少 缺乏研究 自身抗体种类繁多 常见自身抗体： 抗核抗体谱(ANAS)检测 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）检测 类风湿因子和抗CCP抗体 自身免疫性肝病相关自身抗体检测 检验科 拟开展自身抗体检测项目介绍及相关自身免疫性疾病 检验项目 试剂价格 收费标准 抗核抗体 （ANA） 18.9 43.8 ANA谱3 180 329.6 双链DNA 22 19.5 角蛋白抗体（AKA） 29.5 19.5 环瓜氨酸肽（CCP）抗体 39 78.2 肝抗原谱9项 176 221.4 蛋白酶3 （PR3）、髓过氧化物酶（MPO）、肾小球肾炎 78 146.4 抗中性粒细胞浆抗体