本科毕业论文（微生物絮凝剂产生菌的筛选、鉴定及其培养条件优化）.docVIP

编号 河南大学 2009届本科毕生物絮凝剂产生菌的筛选鉴定论文作者姓名： 作 者 学 号： 所 在 学 院： 生命科学学院 所 学 专 业： 指导教师姓名： 沈永红 副教授 论文完成时间： 200年5月日目 录 - 1 - 摘 要 - 3 - 1 前言 - 3 - 2 材料与方法 - 4 - 2.1材料 - 5 - 2.1.1菌种来源 - 5 - 2.1.2 培养基 - 5 - 2.1.3 仪器 - 5 - 2.2 方法 - 5 - 2.2.1菌种分离方法 - 5 - 2.2.2 菌种初筛方法 - 5 - 2.2.3 菌种复筛方法 - 6 - 2.2.4 絮凝率的测定 - 6 - 2.2.5 菌种的鉴定方法 - 6 - 2.2.6 菌种培养条件优化 - 7 - 3 结果与分析 - 8 - 3.1样品采集与分离 - 8 - 3.2 菌种初筛与复筛结果 - 8 - 3.3菌种鉴定结果 - 9 - 3.4 优化实验结果及分析 - 10 - 3.4.1 正交试验结果 - 10 - 3.4.2 正交试验分析 - 11 - 4 结论与讨论 - 15 - 5 参考文献 - 16 - Abstract - 17 - 致 谢 - 18 - 微生物絮凝剂产生菌的筛选鉴定（生命科学学院2005级生物工程 开封 475004） 摘 要：Bacillus licheniformis) 。通过正交试验对其培养条件进行研究确定了其培养条件的优化组合，即碳源为蔗糖、培养时间3天、pH 6.7、温度37℃，并在该条件下培养后测其发酵液的絮凝率。结果显示絮凝率由优化之前的43.2％提高到了条件优化后的55.2％。 关键词：1 前言是一种与传统的无机和有机高分子絮凝剂相比，微生物絮凝剂具有如下特点：1）高效性，同等用量下，微生物絮凝剂的使用效率明显高于常规絮凝剂；2）安全无毒性，完全能用于食品、医药等行业的发酵后处理3）可生化性，即能自行降解，不会带来二次污染；4）较高的热稳定性，如将Paecilomyces sp.菌株产生的絮凝剂煮沸后其活性几乎不变[]；5）用途广泛，脱色效果显著，对多种絮凝颗粒以及合成高分子的可溶性色素物质都具有优良的凝聚能力；6）能产生絮凝剂的微生物种类多，生成快易于采取生物工程手段实现产业化，且生产成本低 影响微生物絮凝剂絮凝能力的因素主要可归结为三个方面：1）产生微生物絮凝剂的微生物菌体自身性质，如细胞结构组成、遗传因素、代谢活性、产生微生物絮凝剂时培养基的营养成份组成及生长时所处的环境情况（如供氧、温度、pH值等）；2）使用微生物絮凝剂时所处的环境，包括温度、pH、金属离子种类及含量情况等；3）被絮凝的对象的性质等。早在20世纪50年代人们就发现了能产生絮凝作用的细菌培养液，真正的深入研究始于1976年由J.Naknmura等人进行的专门研究。至今发现的具有絮凝性状的微生物种类有真菌、酵母菌、细菌、藻类等，由它们产生的微生物絮凝剂类型很多。报道最多的主要有：酱油曲霉（Aspergillus’s sojae）产生的AJ7002絮凝剂[]、红平红球菌S-1（Rhodococcus erythvopolis sp-1）生产的MBFNOC-1[]、拟青霉菌I-1（Paecilomyces sp.I-1）产生的MBFPF101等[]。 2 材料与方法 2.1材料 2.1.1菌种来源 分别以开封浦华紫光水业公司、河南大学北苑菜地及河南大学荷塘取回活性污泥、土壤和淤泥为样品。 2.1.2 培养基 分离培养基：牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂15~20 g，水1000 mL ，pH 7.0~7.2，121℃ 灭菌20 min。 发酵培养基：葡萄糖20 g，KH2PO4 0.2 g，K2HPO4 0.5 g，(NH4)2SO4 0.2 g，NaCl 0.1 g，脲0.5 g，酵母膏0.5，MgSO4 0.2 g，水1000 mL，pH 7.2，112.3℃ 灭菌30 min。 2.1.3 仪器 卧式圆形压力蒸汽灭菌器（YXQ.WY21.600-11R, 张家港华菱医疗设备制造公司） 752N紫外可见分光光度计（上海精科） 恒温培养振荡器（ZHWY-1112B，上海智城分析仪器制造公司） 台式离心机（TDL-608，上海安亭科学仪器厂制造） 洁净工作台（VS-1300-V，苏州安泰空气技术公司） 2.2 方法 2.2.1菌种分离方法 在超净工作台各称取1 g 上述三种样品，溶于100 mL无菌水中制成菌悬液。用移液枪取0.5 mL菌悬液于盛有4.5 mL已灭菌的试管中依次做梯度稀释至10-4，取10-2、10