6、2 基因工程及其应用.pptVIP

* 6、2 基因工程及其应用 一、基因工程的原理 1、概念（又叫基因拼接技术或DNA重组技术）： 2、工具： （1）基因的“剪刀”（“分子手术刀”）——限制酶 ①分布： ②作用： 特点：专一性 ③实例：EcoRI限制酶 ④切割结果：产生２个带有黏性末端的ＤＮＡ片段 （2）基因的“针线”（“分子缝合针”）——DNA连接酶 　　 ①作用：把脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的ＤＮＡ 　　　　　　　骨架上的缺口缝合起来， 　　 ②连接对象：两个具有相同黏性末端的ＤＮＡ片段 ③连接位置：脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的ＤＮＡ骨架上的缺口 　　 ④结果：形成重组ＤＮＡ （３）运输工具（“分子运输车”）——运载体（简称载体） 　 ①作用：将目的基因送入受体细胞 　 ②条件：能在受体细胞内稳定保存并大量复制 　　　　　具有多个限制酶切点 　　　　　具有标记基因 　　 ③常用的运载体：质粒（最常用）： 　　　　　　　　　　噬菌体　　动植物病毒 ３、基因工程操作的基本步骤 （１）提取目的基因　目的基因： 　　　　　　　　　　取得途径：直接分离基因 　　　　　　　　　　　　　　　人工合成基因 （２）目的基因与运载体结合 ①用同一种限制酶切割质粒和目的基因 ②加入ＤＮＡ连接酶 ③质粒和目的基因结合成重组ＤＮＡ分子 （３）将目的基因导入受体细胞：主要是借鉴细菌或